相关实验
实验承诺函
咨询记录
技术文章
城市
时间
上海市
2025-01-18 10:58:13
浙江省温州市
2025-01-17 21:34:06
浙江省丽水市
2025-01-17 16:05:28
国外
2025-01-16 14:06:13
江苏省苏州市
2025-01-16 06:31:36
福建省泉州市
2025-01-15 20:00:19
浙江省金华市
2025-01-15 16:17:36
江苏省泰州市
2025-01-15 14:50:21
浙江省丽水市
2025-01-14 17:44:07
福建省泉州市
2025-01-13 13:13:37
实验介绍
【应用简介】
血管生长是肿瘤发生的关键步骤。无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成,这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。多数恶性肿瘤的血管生成密集且生长迅速,因此,血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用,抑制这一过程将能明显阻止肿瘤组织的发展和扩散转移。体外的血管生成实验能很好的模拟肿瘤的血管发生过程,并且适合研究药物对这一过程的影响。
【技术原理】
应用Matrigel模拟机体环境,上面接种肿瘤细胞,观察血管生成情况。
【实验方法】
Step1:细胞培养
Step2:细胞转染或药物处理
Step3:铺Matrigel胶
Step4:接种细胞
Step5:观察血管生成情况
案例展示
与对照组相比,处理因素能够明显抑制血管生成。
技术总结
1、实验前一天需要将Matrigel置于冰盒,放入冰箱中,同时需要准备一些预冷的枪头用于吸取Matrigel胶;
2、将Matrigel胶加到血管生成载玻片时注意枪头要垂直于内孔的正上方加入Matrigel,防止有Matrigel流经上孔而留下残留胶;
3、需要按照细胞的生长速度定时采集图像,并且对其成管长度、覆盖面积、成环数和结点进行测量和记录,并且对其进行统计分析;
4、分上下孔的ibidi血管生成载玻片能去除凹液面,使成像效果更好。
送检与交付标准
样品类型 | 样品需求 | 保存条件 | 运输条件 | 备注 |
---|---|---|---|---|
冻存细胞 | 1.取对数生长期的细胞,消化离心收集细胞,加入冻存液吹打混匀,装入冻存管,标明细胞名称/细胞代数,冻存细胞数量在1-5*106个/ml。 2.项目启动后细胞复苏,复苏后3天反馈细胞状态,3-5天反馈细胞污染情况,5-7天反馈支原体污染情况。 3. 细胞详细信息(名称、培养基和其他培养条件等,如经过特别处理需告知并提供必要的信息) | 液氮 | 干冰 | 所有样本均须有唯一标记,且标记清晰可识 |
复苏后细胞 | 1.使用T25培养瓶运输。细胞汇合度达到60%以上,装满培养液,只留纽扣大小的气泡,瓶口用封口膜封好,标明细胞名称/细胞代数/接种时间/培养基类型,瓶子固定运输。 2.收到细胞后3天反馈细胞状态,3-5天反馈细胞污染情况,5-7天反馈支原体污染情况。 3. 细胞详细信息(名称、培养基和其他培养条件等,如经过特别处理需告知并提供必要的信息) | 常温 | 常温 | |
质粒 | 1.纯度高,无内毒素,无蛋白质,基因组DNA/RNA污染,质粒A260:A280的比值在1.8-2.0之间 2.浓度不低于0.5μg/μl,总量大于100μg,无内毒素处理 3. 载体详细信息,包括名称、大小、抗性、荧光标记 | -20℃ | 冰袋 | |
病毒 | 1.慢病毒:滴度不低于1*108TU/ml,体积约200μl,标明制备时间,且没有反复冻融 2.腺病毒:滴度不低于1*109PFU/ml,体积约200μl,标明制备时间,且没有反复冻融 3.明确是否表达荧光标签蛋白及其种类,最好需要提供病毒载体图谱; | -80℃ | 干冰 |