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Tunel染色-1
Tunel染色-1

Tunel染色

基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。

  • 细胞凋亡
  • 基因组 DNA
  • 荧光标记
  • TUNEL

实验介绍

应用原理

细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180~200bpDNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素、生物素标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜或化学显色方法检测细胞凋亡的情况。

【技术总结】

一、常见问题

1、无/弱染色

     烤片温度过高,推荐56-601-2h
            一抗是否适用固定液和石蜡切片,使用浓度是否过低,孵育是否时间过短等。

2、染色过深

     染色试浓度过高或孵育时间过长;

     显色剂浓度过高或孵育时间过长。

二、注意事项

1、洗涤蛋白酶K时,一定要PBS冲洗3次,如果冲洗不净会严重干扰后续的标记反应;

23%的过氧化氢溶液孵育时间不应过长,否则会出现过氧化氢导致的DNA断裂,产生假阳性;

3、滴加TUNEL检测液时,可利用防蒸发膜防止其蒸发影响样本的生物素标记;配制好的DAB显色液必须一次性使用完毕,不宜冻存。

交付标准

1实验报告

2真实实验结果

3原始图片

4实验原始数据

5剩余物料在周期内可返还(超过周期,不予返还)

咨询记录

城市 咨询内容 时间
河北省张家口市 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-21 09:57:00
WashingtonSeattle 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-21 09:11:00
Southern FinlandUusi 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-21 05:10:00
河北省张家口市 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-21 03:25:00
CaliforniaLos Altos 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-21 02:23:00
VirginiaLoudoun 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-21 02:00:00
广东省深圳市福田区 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-20 19:52:00
江苏省盐城市大丰区 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-20 13:16:00
江苏省盐城市东台市 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-20 13:16:00
Magdalena 咨询Tunel染色服务相关 2026-06-20 10:28:00