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科研笔记｜RNA pull down实验

2026-07-12

来源/作者：普拉特泽生物-医学整体课题外包

做非编码RNA、基因调控研究的科研人，大概率都遇过这样的困境：
找到了差异表达的lncRNA/circRNA/miRNA，却卡在机制验证第一步——这条RNA到底和哪些蛋白互作？如何通过结合蛋白调控细胞表型、疾病进程？
答案，藏在RNA Pulldown实验里🧬
作为RNA-蛋白互作研究的金标准体外技术，RNA Pulldown是解析RNA功能、挖掘转录后调控机制的关键手段，帮无数科研人打通“RNA分子→结合蛋白→功能通路”的研究闭环！
RNA pull-down实验可用于研究RNA与蛋白质之间的相互作用，其原理基于RNA与目标蛋白质的特异性结合，并利用这种结合关系来富集和分离目标蛋白质。RNA pull-down实验的几个关键步骤为： 1️⃣RNA探针制备：首先，将目标RNA序列合成或转录成RNA探针。通常，在RNA探针的5'端或3'端会引入一个亲和标记（如生物素或荧光染料）。 2️⃣RNA探针结合：RNA探针与目标蛋白质溶液混合，使其发生结合。这可以通过某些条件（如盐浓度、温度和缓冲液成分）来促进RNA与蛋白质之间的特异性结合。 3️⃣RNA pull-down：将RNA探针与结合的蛋白质一起添加到细胞裂解液中。RNA探针通过其亲和标记与固定在固相材料上的亲和配体（如亲和磁珠）结合。 4️⃣洗脱：通过一系列洗涤步骤，去掉非特异性结合的蛋白质，以保留与RNA探针特异性结合的蛋白质。 5️⃣分离和分析：通过热变性、酶切或其他方法，将结合的蛋白质从RNA探针上解离，并用于进一步的分析，如WB、质谱分析或蛋白质鉴定。
普拉特泽生物 RNA Pulldown 一站式服务
深耕分子生物学实验多年，我们拥有成熟的RNA互作实验技术体系，全程规避实验雷区，为科研高效赋能！从探针制备、实验操作到数据分析、报告交付，全程跟进，提供原始数据+详细实验报告，直接可用予课题、论文投稿，不用亲自反复摸条件、熬周期，把专业的实验交给专业团队，节省80%实验试错时间，快速推进RNA机制研究！
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