EMSA凝胶迁移实验原理介绍
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EMSA凝胶迁移或电泳迁移率实验实验介绍由普拉特泽生物旗下科研培训品牌—春风学院总结分享,文尾有EMSA实验理论与实操视频教程供大家学习。EMSA是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,而普拉特泽生物作为专门承接各类生物实验代做服务的科研企业,在成百上千次的EMSA实验操作中积累了丰富的理论与实操技术经验,能在各种情况下的到EMSA实验的完美结果,今天小编就简单介绍一下这个实验,一起来学习吧!
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异),和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)可以:
1.研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用;
2.可用于DNA定性和定量分析;
3.用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
EMSA实验相对来说没有非常的复杂,关于EMSA更多理论知识与实际操作想要学习的同学欢迎点击《EMSA 理论+实操》详细了解实践哦,有关于EMSA实验更多问题的同学欢迎随时留言,普拉特泽永远在线~