细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动，是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一，是机体正常生长发育的生理过程，也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。

目前人们对恶性肿瘤的研究是多方面的，从癌症的产生到转移，血管供给以及分裂增殖都一直是医学和生物学研究的热点。对于肿瘤细胞而言，其迁移特性已经成为评价抗肿瘤药物的重要特征；研究细胞迁移的方法较多，如划痕法、Transwell、实时细胞追踪和细胞芯片法等。

   今天主要给大家介绍一种应用最广泛的检测方法：细胞划痕实验

一、细胞划痕的实验原理

   细胞划痕实验(Wound Healing) 是一种研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外实验方法。这种方法的原理为当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合，于细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像，通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值，可对细胞的迁移能力做出判断。
   传统实验方法：在融合的单层细胞上用枪头比着直尺尽量垂直于背后的横线划痕；

二、细胞划痕实验步骤

   ①划线，首先用马克笔在六孔板的背部进行划线，每孔划3-5条线

   ②铺板，调整好细胞状态后，每孔铺6×10⁵个细胞，铺板的密度需要根据细胞本身的生长特性适当调整

   ③划痕，当细胞铺满单层之后，用10μL的枪头紧贴直尺，垂直于马克笔标记的横线在孔中划线

   ④图像采集，在100倍显微镜下拍照，保证划痕居中，同时注意背景一致。

三、细胞划痕实验结果分析

   1、图片处理及划痕宽度测量

   方法一：PS软件划线测划痕宽度

   方法二：ImageJ软件测划痕面积

   2、愈合率计算及柱状图展示

   以时间为横坐标，愈合度为纵坐标进行结果的呈现

四、细胞划痕实验适用范围

   研究细胞基质和细胞间相互作用对细胞迁移的影响

   1.可用于探究药物、基因等外源因素对细胞迁移的影响

   2.一般适用于检测贴壁生长肿瘤细胞的迁移转移能力(上皮细胞、纤维样细胞等)

       ①这些细胞本身具较强迁移能力
       ②细胞对无血清或低血清的有较强的耐受力(至少24小时)

五、细胞划痕实验注意事项

   1、细胞划痕时细胞没有长满，或是长的太满

   铺板时的数量需根据细胞的形态、增殖速度、大小进行调节，细胞较小或增殖速度慢，铺板数量需多于6×10⁵个细胞/孔；细胞较大或增殖速度较快则需少于6×10⁵个细胞/孔。
   2、怎么样减少划痕距离的误差
   不同孔之间划痕最好使用同一只枪头，划痕时枪头垂直，不能倾斜，可比着直尺，保持力度一致，一次性划完。
   3、划痕实验过程中培养条件为什么是无血清或是低血清

   可以减少单纯的细胞增殖对迁移的影响。

细胞划痕实验具体操作视频教程地址（建议微信打开）：http://weike.fm/R403947292

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