生活不缺少美，只是缺少发现美的眼睛。而只要会统计分析，科研就不缺灵感。如这篇发表在期刊The Journal of Clinical Investifgation（IF = 11.864），上标题为TYRO3 induces anti-PD-1/PD-L1therapy resistance by limiting innate immunity and tumoral  ferroptosis的文章。

文章用了大量的统计分析结合部分实验，成功揭示了肿瘤细胞中TYRO3 的表达与免疫逃逸及铁死亡机制。

程序性死亡受体配体（PD-L1）与T细胞上的受体PD-1结合，会抑制T细胞活化，引起T细胞凋亡。免疫检查点阻断疗法（ICB）可以通过调节T细胞活性来提高肿瘤免疫反应的治疗方法。但是，由于存在对这种治疗的耐受性，只有大约10%-30%的患者可以从通过阻断PD-1/PD-L1轴功能的ICB疗法中获益。目前有研究发现针对RTKs（受体酪氨酸激酶）的抑制剂可对抗各种恶性肿瘤，可能是克服耐受性的潜在治疗靶点。

另外，有研究表明T细胞诱导的肿瘤细胞铁死亡，有助于PD-L1单抗诱导的肿瘤生长抑制。

总结下来，本文的研究思路十分清晰：

1. TYRO3高表达、及磷酸化与抗PD-1/PD-L1治疗的患者预后差相关；

2.TYRO3有利于抗炎TME（肿瘤微环境），使肿瘤细胞能够抵抗ICB疗法；

3.TYRO3通过上调VEGF降低M1/M2的比率，从而促进了原肿瘤的TME；

4.TYRO3通过AKT/NRF2轴抑制肿瘤细胞铁死亡，而肿瘤细胞可利用来自邻近死亡细胞的磷脂酰丝氨酸(PS)信号，激活TYRO3。

5.抑制TYRO3可增强肿瘤细胞铁死亡，使肿瘤对ICB疗法敏感。

机制图

我们一起来看本文的Results部分：

一、在接受抗PD-1/PD-L1治疗的患者中，高TYRO3表达与预后差相关

首先，将4T1乳腺癌细胞接种到BALB/c小鼠的乳腺脂肪垫，然后用小鼠抗PD-1（抗mPD-1）抗体治疗，建立抗性模型（4T1-R），4T1-R肿瘤对抗mPD-1治疗没有反应。

随后，筛选可能参与抗PD-1抗性的激酶；通过受体络氨酸激酶抗体阵列筛选（RTKs，细胞信号传导的主要信号酶，也是重要的肿瘤药物靶标），4T1-R细胞中TYRO3、EPHB2、FLT3和TRKA的表达或磷酸化水平高于4T1-P细胞，其中TYRO3的增加最高。

为了验证临床相关性，利用两个数据库：肿瘤免疫功能障碍和排除(TIDE)、基因组学临床结果预测(PRECOG)；发现：TYRO3是唯一参与抗PD-1抵抗的肿瘤相关RTK成员，且与多种肿瘤相关。

不仅如此，作者还在数据库中发现：在低TYRO3表达水平的患者中，T细胞高度浸润肿瘤与患者总体生存率的延长相关；但在TYRO3表达水平高的患者中不存在。

而RNA-Seq检测显示：T细胞水平与基因拷贝数高TYRO3患者的延长存活率无关，但确实介导了TYRO3基因拷贝数低患者的延长存活率。表明：TYRO3降低T细胞的肿瘤杀伤作用。

进一步确定TYRO3与抗PD-1治疗结果的相关性：耐药性肿瘤患者TYRO3表达水平明显高于肿瘤有反应的患者（Fig1.E）。

而WB检测：TYRO3、p-TYRO3在4T1-R肿瘤中上调，

免疫组化检测：29例肺癌患者中，耐药患者TYRO3表达显著较高。

综上，患者肿瘤组织中的TYRO3高表达并发生磷酸化，与抗PD-1治疗的耐药性相关。

注：

受体络氨酸激酶RTKs类型：表皮生长因子受体家族EGFRs，血小板衍生生长因子受体家族PDGFRs，神经生长因子受体家族NGFRs成纤维细胞生长因子受体FGFRs，胰岛素样生长因子-1受体家族IGF1Rs，巨噬细胞集落刺激因子受体家族MCSFRs，血管内皮生长因子受体家族VEGFRs胰岛素受体家族INSR，肝细胞生长因子受体家族HGFRs。

二、TYRO3使肿瘤细胞能够抵抗PD-1治疗

那么，TYRO3是否足以引起抗PD-1抗性呢？

接下来，文章比较了小鼠模型中TYRO3过表达(Tyro3-OE)和4T1-P对抗mPD-1治疗的反应。抗mPD-1治疗可显著降低4T1-P小鼠肿瘤的发生率，但对Tyro3-OE没有。说明，Tyro3的过度表达促进了这些肿瘤的抵抗性（Fig2.B-D）。

而在Tyro3-/-组中，抗mPD-1治疗的小鼠比4T1-R肿瘤存活时间更长（Fig2.E-G），也说明Tyro3在抗mPD-1治疗抗性中发挥了重要作用。

为了更好地了解TYRO3在抗PD-1耐药中的作用，对4T1-P、Tyro3-OE、4T1-R和Tyro3-/-细胞RNA进行了全转录组分析：Tyro3-OE和4T1-R之间的转录组变化高度相似。

在287例黑色素瘤患者生物通路分析（Fig2.I），TYRO3在抗PD-1耐药性中发挥作用，TYRO3有利于抗炎性肿瘤微环境（TME）。

三、TYRO3通过抑制铁死亡、促进原肿瘤TME来诱导对抗PD-1治疗的抗性

通过飞行时间质谱(CyTOF)和表图聚类分析Tyro3-OE和4T1-P免疫特征的总体变化：Tyro3-OE肿瘤中，M1/M2的比率的降低（Fig3.B）；表明，TYRO3促进了M1-M2巨噬细胞的极化。