植物组织DNA提取步骤由普拉特泽生物技术分享，DNA全称是脱氧核糖核酸，普拉特泽生物分子检测平台为大家提供各种分子检测外包实验，积累了大量实操经验，本文就跟大家分享植物组织DNA提取的实验步骤~

        一、植物组织DNA提取仪器与设计准备

        实验仪器：高速离心机；烘箱；冰箱；水浴锅；高压灭菌锅；Nanodrop。

        实验试剂：玻璃珠，十二烷基磺酸钠(SDS)；三羟甲基氨基甲烷（Tris）；乙二胺四乙酸（EDTA）；氯化钠；苯酚；氯仿；无水乙醇等。

        二、植物组织DNA提取步骤

        植物组织的DNA提取通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对 DNA 的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。详细操作步骤如下：

    1、SDS 提取缓冲液在 65℃水浴中预热。

    2、将叶片置于 1.5ml 离心管中，液氮速冻，组织研磨器打样。

    3、加入 700 ml 的 SDS 提取缓冲液，涡旋摇匀。

    4、置于 65℃的水浴中，每隔 10 min 轻轻摇动，30 min 后取出。5.加入 200 ml KAc 溶液，摇匀，放入-20℃冰箱 30 min。

    5、10000 rpm 离心 5 min，上清移至新离心管中，12000 rpm 离心 5 min。

    6、上清移至新离心管中，加入 700 ml 异丙醇， -20℃冰箱 30 min。

    7、10000 rpm 离心 5 min，弃上清，加入 500 ml 70%乙醇漂洗。

    8、弃液体，晾干。

    9、DNA 纯度与浓度测定 （使用 nanodrop）。

              DNA 纯度：DNA 的 OD260/OD280 一般为 1.8 左右。

              OD260/OD280 » 1.8：说明较纯；

              OD260/OD280 > 1.8：说明可能有 RNA 污染；

              OD260/OD280 < 1.8：说明可能有蛋白质污染。

        三、植物组织DNA提取注意

    1. 叶片磨得越细越好。

    2. 注意移液器的正确使用。

    3. 由于植物细胞中含有大量的 DNA 酶，因此，除在抽提液中加入 EDTA 抑制酶的活性外，第一步的操作应迅速，以免组织解冻，导致细胞裂解，释放出 DNA 酶，使 DNA 降解。

    好啦，那植物组织DNA提取步骤就讲完啦，如果您还有其他的问题或有分子检测实验外包的需求欢迎随时联系普拉特泽生物~