细胞划痕实验操作步骤由普拉特泽生物实验技术为大家总结分享。细胞划痕实验是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移的方法。普拉特泽生物——细胞实验平台专业承接细胞划痕等细胞实验代做服务，积累了大量的实操经验。今天小编就跟大家分享，在实操锤炼打磨中出来的细胞划痕实验Culture Insert方法和普通细胞划痕的操作步骤，一起来看看吧~

        一、细胞划痕实验Culture Insert方法操作步骤

        1、准备细胞，培养液，culture lnsert。

        2、如图，将细胞接种于Dish中间的Insert，细胞长满Insert 区域后用镊子移除Insert即可产生500μm宽度的划痕。

        3、每隔4-6小时拍照记录。

        4、根据收集图片数据分析实验结果。

        二、常规细胞划痕法操作步骤

        实验器材：细胞培养板、marker笔、直尺、微升枪头、培养基、PBS

        1、培养板划线

        首先使用 marker 笔在 6 孔板背后，用直尺比着，均匀的划横线，大约每隔 0.5~1cm 一道，横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。划线时注意线不要太粗 。

        2、铺细胞

        在孔中加入约 5×105 个细胞（不同的细胞数量有所不同，根据细胞的生长快慢调整），接种原则为过夜后融合率达到 100%。

        3、细胞划线

        第二天用枪头或者无菌牙签，垂直与细胞平面，沿着头一天划在平板背面的线在细胞层上进行划痕(不同孔之间最好使用同一只枪头或牙签)。

        4、洗细胞

        划痕完成后，使用无菌 PBS 洗细胞 3 次，洗去不贴壁的细胞，即划线时划线的细胞，是划线后留下的间隙清晰可见，然后更换新鲜无血清培养基。

        5、细胞培养、观察

        将细胞放入 37℃ 5% CO2培养箱，培养。然后在适当的时间点，如 0，6，12，24h 取出细胞，显微镜线观察并测量划痕的宽度，并拍照(具体时间依实验需要而定)。

        6、结果分析

        使用 Image J 软件打开图片后，随机划取 6 至8 条水平线，计算细胞间距离的均值。

        注意：保持实验环境的无菌性；选择适当的细胞贴壁；采用无血清培养液

        好啦，那实验结果我们就分享到这里啦！如果您还有关于细胞划痕实验的操作问题需要咨询或有细胞划痕实验代做的需求，可以直接留言给客服，技术会第一时间回复到您的哦！