今天普拉特泽给大家介绍一个新的实验——彗星实验（单细胞凝胶电泳实验）。彗星实验介绍由普拉特泽生物细胞实验平台为大家总结分享，文末附有彗星实验的视频教程供大家学习，一起来看看吧。

        彗星实验，亦称单细胞凝胶电泳实验。是指一种通过检测DNA链损伤判断遗传毒性的技术，是一种在单细胞水平检测DNA损伤程度的方法。在载玻片上用少量琼脂糖凝胶包埋单个分散细胞，细胞经裂解、解旋和电泳后，断裂的DNA在电场力作用下向阳极移动，经荧光染料染色，在荧光显微镜下观察彗星样图像。

        彗星实验是一种有效评估DNA损伤的方法。其原理是器官或组织经处理（如辐射、重金属等）后，细胞中的DNA发生单链或双链断裂，经细胞及其核膜裂解后，DNA解旋，在电场作用下，DNA 断片迁移出细胞核，形成彗星状的电泳图谱。

        它能有效地检测并定量分析细胞中DNA单、双链缺口损伤的程度。当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中，而核DNA由于相对分子质量太大只能留在原位。在中性条件下，DNA片段可进入凝胶发生迁移，而在碱性电解质的作用下，DNA发生解螺旋，损伤的DNA断链及片段被释放出来。由于这些DNA的相对分子质量小且碱变性为单链，所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极迁移形成彗星状图像，而未受损伤的DNA部分保持球形。

        DNA受损越严重，产生的断链和断片越多，长度也越小，在相同的电泳条件下迁移的DNA量就越多，迁移的距离就越长。通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移长度就可以测定单个细胞DNA损伤程度，从而确定受试物的作用剂量与DNA损伤效应的关系。该法对检测低浓度遗传毒物具有高灵敏性，有研究的细胞不需处于有丝分裂期，而且只需要少量细胞的优点。

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