大家好~今天普拉特泽生物继续跟大家一起学习脑缺血模型的实验步骤，上期动物实验平台分享了实验研究中最常用的大脑中动脉栓塞 (MCAO) 模型造模步骤，本文我们继续来学习另一种被广泛用于慢性脑缺血研究的动物模型——二血管阻塞慢性脑缺血模型，普拉特泽生物动物实验平台为广大实验人员提供脑缺血造模实验外包服务，欢迎咨询。

        二血管阻塞慢性脑缺血模型是结扎大鼠双侧颈总动脉造成脑血流的下降并能较好模拟慢性缺血所致的病理改变，操作简单、重复性好、死亡率低，被广泛用于慢性脑缺血的研究。该模型可造成脱髓鞘改变、轴突丢失、胶质细胞增生等白质损伤的病理改变。二血管阻塞慢性脑缺血模型的实验动物选择上和MCAO一样，由于雌激素对缺血结果有影响，一般选用雄性大鼠。最常用的动物是250~300g的雄性 Wistar大鼠。Sprague-Dawley(SD)大鼠和其他品系的大鼠亦可用于本模型的制作。

        二血管阻塞慢性脑缺血模型的制作步骤如下：

        1、所有操作均在无菌条件下进行。手术人员应戴口罩和无菌手套，穿无菌隔离衣进行手术操作：

        （1）动物呈仰卧位；

        （2）颈部正中切口，暴露气管和双侧颈总动脉，用眼科镊分离并挑起颈总动脉；

        （2）暴露一侧颈总动脉，将一根外科丝缝线结扎颈总动脉用同样的方法分离并结扎另一侧颈总动脉；

        2、手术操作步骤

        (1)将大鼠放入麻醉箱中，用含2%异氟醚的70%氧化亚氮和30%氧气的混合气体以5L/min的氧气流速进行麻醉诱导，3~5min后，大鼠进入麻醉状态，之后以1L/min的氧气流速进行维持。

        (2)术前褪毛，聚维酮碘常规消毒手术区域。

        (3)为了控制平均动脉压、动脉血气量和血糖含量，应同时行尾动脉插管。把2根电极通过小的皮肤切口插入双侧颞肌，以获取脑电图。在整个实验中，平均动脉血压和脑电图的获取依赖动力实验系统。

        (4)通过尾动脉抽取动脉血，运用动脉血气体分析仪和血浆葡萄糖测定仪，对血气和血糖含量进行测定。

        (5)在缺血前15 min和缺血后15 min对动脉血气和血糖含量进行测定，在整个实验过程中血液气体含量都保持在正常的生理范围内。

        (6)在大鼠腹侧颈部皮肤正中线处做一个切口，小心分离两侧的颈总动脉和周围组织以及迷走神经。

        (7)把直肠温度探测器插入到直肠中监测体温。热电耦33G温度探测器植入颞肌，监测头部温度。在动物身体和头部上方的热光源的帮助下，身体和头部温度在整个手术过程中保持在(37±0.2)℃。

        (8)当所有的准备工作已经完成时，异氟醚的浓度保持在1%。

        (9)在缺血前15min，监测血压中的气体含量，平均动脉血压、脑电图、直肠和头部温度，并且保持在正常的生理范围内。

        (10)将两侧颈总动脉通过外科丝缝线5-0结扎以诱导脑血流低灌注。

        (11)缝合皮肤，结束麻醉过程。大鼠仍然需要进行70%氧化亚氮和30%氧气的混合气体辅助呼吸，并且保持颞肌和直肠的温度在37℃，直到它从麻醉状态清醒过来，此过程通常需要30~60min。移除头部和直肠温度探测器后，把大鼠放回到其原来的笼子。

        (12)密切监控大鼠呼吸，直到呼吸恢复平稳。1~2h后，大鼠可以转移至动物房，常规供应食物和水。

        (13)颈总动脉闭塞分步法：为避免脑血流量突然出现相对严重的下降，可按以下步骤逐步闭塞颈总动脉。大鼠用异氟醚麻醉，颈腹正中切口。暴露左侧颈总动脉，与迷走神经轻轻分离，用三条结扎线(2-0)闭塞。1周后，做一个新的切口，右颈动脉同样被阻塞。

        那二血管阻塞慢性脑缺血模型的造模步骤小编就介绍到这里啦~希望呢能够给您在造模过程中遇到的问题带来一定的帮助，如果您对脑缺血模型还有更多的疑问或脑缺血模型外包的需求，欢迎联系普拉特泽生物客服人员~我们下期见！