在脑缺血模型实验中，假手术组（Sham组）的设置至关重要，直接影响实验结果的可靠性。不合理的假手术操作可能导致假阳性结果，使研究结论产生偏差。普拉特泽生物承接脑缺血模型实验等动物实验相关服务上万例，
积累了操作大量经验，为大家详细如何科学设置假手术组，从手术操作、生理参数控制、分子检测到行为学评估，全方位降低假阳性风险。
同时为广大科研工作者开展线上的理论培训与线下实操，可承接动物实验外包服务。

1. 为什么假手术组容易产生假阳性？

假阳性通常由以下因素导致：

●手术创伤干扰（开颅、血管分离等引发炎症反应）

●麻醉时间差异（影响神经功能和代谢状态）

●血流动力学变化（临时血管操作影响脑灌注）

●非特异性应激反应（手术刺激导致激素水平波动）

若假手术组未严格匹配模型组的操作流程，可能使对照组也出现类似缺血的变化，导致统计差异不显著或错误结论。

2. 假手术组设置的核心原则

（1）手术操作匹配

①模拟全流程：包括皮肤切开、颅骨钻孔、血管暴露（但不阻塞或栓塞）。

②麻醉时间一致：MCAO模型通常需60-90分钟，假手术组应匹配相同时长。

③体液平衡：模拟失血（如抽取少量血液或注射等量生理盐水）。

（2）血流动力学控制

激光多普勒监测：确保假手术组皮层血流波动＜15%。

颈动脉临时阻断（Sham-CAO）：如必须模拟血管操作，阻断时间应＜5分钟。

血压监测：维持平均动脉压（MAP）在85-120 mmHg，避免低灌注影响。

（3）炎症与血脑屏障检测

术后24h检测指标：

⒈IL-6水平应＜模型组的30%

⒉TNF-α浓度＜50 pg/mL

⒊血脑屏障完整性（EB渗出量＜模型组20%）

3. 关键验证指标

（1）分子水平验证

HIF-1α表达：假手术组应＜缺血组的1/3

MMP-9活性：＜模型组的25%

小胶质细胞激活（Iba1+）：阳性率＜5%

（2）行为学评估

改良神经严重程度评分（mNSS）：假手术组总分≤2（模型组通常≥8）

转棒测试：持续时间差异＜10%基线值

足部误触率（Foot-fault test）：＜5%

（3）组织学检查

TTC染色：梗死体积＜5%全脑体积

Nissl染色：神经元密度差异＜15%（对照侧 vs. 手术侧）

GFAP（胶质瘢痕）：形成面积＜1 mm²

4. 高级对照策略

（1）梯度假手术组

▲轻度创伤组：仅皮肤切开

▲中度创伤组：血管暴露但不阻断

▲重度创伤组：短暂血管阻断（＜5分钟）

（2）双假手术设计

▲组1：模拟血管分离（不阻断）

▲组2：仅开颅（不接触血管）

▲组3：麻醉对照组（无手术）
（3）转基因动物对照

使用条件性Cre对照（如GFP标记组）排除基因编辑影响。

5. 如何降低假阳性率？关键措施总结

科学设置假手术组是脑缺血研究的关键。通过严格匹配手术流程、监测血流动力学、量化炎症反应，并结合多模态验证（分子、行为、组织学），可有效降低假阳性率（＜5%）。
建议采用梯度假手术组+双假手术设计，并结合实时生理监测，确保实验结果的可靠性。

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