流式检测细胞周期的注意事项由普拉特泽生物根据承接的几千例流式检测细胞周期实验和各种实验过程中的技术咨询总结而来，普拉特泽生物专注提供线下生物实验研究，积累了大量经验，为广大科研工作者提流式检测细胞周期等各类生物学实验外包。

   那么今天的流式检测细胞周期注意事项我们分为两个方面为大家解读：

   一、流式检测细胞样本的制备的注意事项

   1、根据不同的检测细胞调整合适的温度、湿度、酸碱度等培养环境，注意一定要无菌的环境培养。

   2、培养细胞时，以对数期处理为宜，避免细胞量过少导致收集细胞量不足或者细胞量过多导致细胞开始大量死亡造成的实验误差。

   2、流式检测细胞周期上机检测所需收集细胞量较多，收集细胞时尽量多收集一些

   3、流式检测对细胞离心，重悬次数较多，注意动作轻缓，避免过多地损伤、弄破细胞。

   4、本实验对细胞离心，重悬次数较多，注意动作轻缓，避免过多地损伤细胞。

   5、细胞周期待测细胞尽量要获得单个细胞，避免DNA的降解。

   6、样本最关键的就是减少碎片(EDTA/不可过度吹打/离心rpm)。PI既能与DNA结合，又能与RNA结合，所以要用RNase降解。PI质量及RNase所加量很重要，建议用商品化试剂。

   7、污染脱氧核糖核酸酶会降解DNA，故玻璃器皿和试剂要干净灭菌。

   8、染液等物质有一定毒性，注意防护。

   二、流式检测时的注意事项：

   1、固定时必须预冷PBS重悬打入无水乙醇中，二者顺序不可颠倒。

   2、固定后细胞虽然可以保存较长时间后再上机检测，为避免不可控因素影响最好尽早上机检测。

   3、进样速度：一般检测细胞浓度调整为2*10^5到2*10^6/mL，进样速度为低速。若峰形较宽，可能就是进样速度太快。

   4、仪器质控定期做，尽可能排除因机器设置引起的峰形加宽。排除粘连细胞(FL2-A/FL2-W)。

   5、通过电压脉冲信号的宽度和面积区别实体组织标本中的粘连细胞群体，最大程度的减少粘连细胞带来的假阳性结果。
   到这里，用流式检测细胞周期操作过程中我们要注意的问题就讲完了，学习流式检测细胞周期实验步骤可点击此处跳转，如果朋友们还有新的问题或要补充的注意事项可以随时联系我们的客服小姐姐补充交流学习哦。当然如果您有细胞周期检测等实验外包的需求，普拉特泽随时为您服务。