在miRNA研究的这条路已经车水马龙了，如何在芸芸众生中抓住审稿人的视线获得高分文章，就需要研究者有丰富的知识体系和创新精神了。

这次小编带大家解读的文献就很好的诠释了这点：咱不研究miRNA，咱研究功能跟miRNA很相似的RNA结合蛋白。下面就跟着小编来看下这篇文献吧。

文章题目：

翻译：RNA结合蛋白ZFP36L1与HSP70家族在骨性关节炎OA中的作用

一、名词解释：

HSPA1A：热休克蛋白70（HSP70）家族成员之一

ZFP36：一种古老的RNA结合蛋白，可以与靶mRNA的3'-UTR中的ARE结合来触发ARE介导的mRNA去稳定化

二、研究背景：

骨关节炎（OA）是导致残疾的主要原因，软骨破坏作为OA发病机制标志是由基质降解酶的上调或软骨细胞外基质（ECM）分子的下调引起的。RNA结合蛋白可以直接结合其靶mRNA的3'-非翻译区（3'-UTR）中的富含AU的元件（ARE），并促进poly-A尾部去除和mRNA衰变。

三、研究正文：

研究者首先在OA患者和OA模型小鼠（DMM韧带剪断手术造模）的软骨组织中发现ZFP36L1的蛋白含量相比于正常软骨组织有明显的升高，同时基质降解酶MMP3、MMP13表达下调（见下图（a）IHC检测结果）。

作者猜测ZFP36L1可能与OA有关。于是通过构建腺病毒过表达系统，在动物模型上实现ZFP36L1的上调表达。发现：ZFP36L1的过表达并不影响OA的疾病进程，即既不改变软骨组织中基质降解酶的含量也不影响软骨细胞外基质（ECM）相关分子Coll-II和Aggrecan的表达改变（下图c）。

随后，作者制备了两种不同的模型鼠：

① 12周龄的Zfp36l1-/-基因敲除雄性小鼠，并做韧带切断手术制备OA模型；

② 常规小鼠做韧带切断后尾静脉注射Zfp36l1干扰腺病毒；发现Zfp36l1低表达的小鼠模型中，OA的疾病表症显著低于未敲除组：番红固绿染色（下图a&c），OA评级、骨锥成熟度、软骨下骨板厚度（下图b&d），

以上作者充分证实了ZFP36L1的下调表达能够显著的抑制骨性关节炎，那么接下来，作者进一步探讨了ZFP36L1在OA中的作用机制。

首先，先上一波测序，作者发现对ZFP36L1进行shRNA干扰后，有18个基因的mRNA水平出现了显著上调（flod change＞2.0），以Hspa1a和Hspa1b最为显著（下图a）。由于HSPA1a和HSPA1b结构差别不大（10个核苷酸和1个氨基酸的差别），在此作者接下来只研究HSPA1a。作者通过RIP发现ZFP36L1结合HSPA1a的3'-UTR区（下图d），由此可得ZFP36L1直接调控HSPA1a。

考虑到热休克蛋白70（HSP70）家族对多种细胞的炎症，氧化应激和细胞凋亡有保护作用，为了验证HSPA1a是否参与ZFP36L1敲低对OA发病机制的抑制作用，研究者用腺病毒在OA模型鼠中过表达了HSPA1a（下图a），并在DMM处理后的AO模型小鼠的膝关节软骨组织发现：HSPA1a过表达组中番红固绿染色显示炎性减弱（下图b&c），OA评级下降、骨锥成熟度无显著性差异、软骨下骨板厚度无显著差异（下图d）。

我们通常认为OA的发病机制主要是由：①由基质降解酶的上调；②软骨细胞外基质（ECM）分子的下调；③软骨细胞的凋亡引起的。

作者发现ZFP36L1敲低或HSPA1a过表达对基质降解酶和软骨ECM分子的表达水平并没有显著改变，可见二者并不是ZFP36L1-HSP70途径的直接靶标。考虑到软骨细胞的凋亡在OA软骨破坏中也起着重要作用，且HSPA1a有已知的可以保护各种细胞类型免于凋亡的功能。于是作者检查了HSPA1a是否可以通过防止软骨细胞凋亡从而达到抑制OA的作用。于是在过表达HSPA1a的OA模型鼠中观察到了软骨细胞凋亡的显著减少，由此得出结论：HSPA1a可以直接抑制软骨细胞凋亡。

最后，研究者调查了HSPA1a在ZFP36L1上调/下调的OA模型鼠中的作用，发现HSPA1a的敲除促进了ZFP36L1在OA中的软骨侵蚀能力，但不影响骨赘形成或软骨下骨板增厚。

四、总结：

文章的几个主要结论：

1、OA中RNA结合蛋白ZFP36L1的特异性上调，但外源进行ZFP36L1基因的过表达并不能影响OA的疾病进程，反之敲除可抑制。

2、ZFP36L1的直接作用靶点为HSPA1a，HSPA1a通过抑制软骨细胞凋亡来预防OA，不参与骨赘形成和软骨下骨板增厚。

3、在OA小鼠模型中，于膝关节腔中注射ZFP36L1-shRNA腺病毒或HSPA1a的过表达腺病毒能够缓解小鼠的疾病进程。

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