大家好，今天普拉特泽生物跟大家一起学习一个新的实验——细胞划痕实验。细胞划痕实验（WoundHealing）是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿痛侵袭的体外试验方法。细胞划痕实验介绍由普拉特泽细胞实验平台分享，细胞平台专门为科研工作者提供细胞划痕实验代做服务，提供结果真实，技术高质量的细胞实验服务。现在我们就来看看细胞划痕实验的原理和应用流程吧！

  细胞划痕实验是测定细胞迁移运动与修复能力的常用方法，类似体外伤口愈合模型，故又称伤口愈合法。细胞划痕实验的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”俞台，基本的步骡包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期数据的处理。

  细胞划痕实验的操作主要是：在体外将细胞培养在培养皿或平板上，当细胞长到融合成单层状态时，用微量枪头或其他硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为"划痕"。然后继续培养细胞，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使"划痕"愈合，每间隔一段时间（如间隔12小时），显微镜下拍照，记录细胞向中央空白区迁移情况，以此判断细胞的迁移能力。

        1、细胞接种

        2、细胞划痕

        3、细胞迁移期间图像拍照

        3、数据处理。

        那细胞划痕实验可以应用在哪些方面呢？给大家介绍一个案例（文末附参考文献）。

        细胞划痕实验可用于：硫酸软骨素与地塞米松在自动化软骨细胞划痕损伤修复中的作用研究

        1、自动平台上制造软骨细胞划痕模型。

        2、通过划痕闭合情况，获得CS促进软骨损伤修复的最佳浓度。

        3、研究硫酸软骨素和地塞米松对软骨细胞损伤修复的影响。

        研究方法：

        1、体外提取、培养原代SD大鼠关节软骨细胞，通过细胞形态学及II胶原免疫荧光染色方法进行细胞鉴定。

        2、应用自动平台制造软骨细胞划痕模型。

        3、实时监测观察软骨细胞划痕的闭合过程。

        4、应用计数有划痕处固定相等区域内软骨细胞数目，确定促进软骨细胞愈合的最佳硫酸软骨素（CS）浓度。

        5、应用live/dead kit staining方法观察细胞存活率。

        6、应用免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）检测单纯划痕组、CS组、地塞米松组、CS和地塞米松共同作用组对I型及II型胶原的表达情况。

        实验结果：

        1、应用自动平台制造出8通道的划痕，划痕具有水平的起点、止点及相同的宽度。

        2、浓度为200μg/ml的CS对于软骨细胞划痕愈合的促进作用最大。

        3、两种药物共同作用时CS可减轻地塞米松对于软骨细胞增殖的抑制作用，I型胶原表达量较单独应用地塞米松组减少，II型胶原表达量则增多。

        实验结论：

        1、硫酸软骨素对于软骨细胞划痕愈合具有促进作用，且在浓度200μg/ml时作用效果最佳。

        2、硫酸软骨素对于糖皮质激素引起的软骨损伤具有修复作用。如临床应用糖皮质激素，可加用硫酸软骨素保护关节软骨。

        好啦，那关于细胞划痕实验的简单介绍我们就讲到这里啦，有细胞实验不懂的问题或者需要细胞实验外包可以留言，咱们会逐一联系，详细沟通的哦！

        【参考文献】

        Culture of bovine articular chondrocytes in funnel-like collagen-PLGA hybrid sponges This work was presented at the International Union of Materials Research Societies（International Conference in Asia）（Qingdao,China,Sep.25–28 2010）.[J].Hongxu Lu,Young-Gwang Ko,Naoki Kawazoe,Guoping Chen.Biomedical Materials.2011(4)

        殷贵鲲.硫酸软骨素与地塞米松在自动化软骨细胞划痕损伤修复中的作用[D].大连医科大学,2014.