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细胞凋亡检测实验注意事项——细胞凋亡实验外包

2022-03-17 13:29:46

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

   流式检测细胞凋亡注意事项介绍由普拉特泽生物流式检测平台总结归纳。普拉特泽生物流式检测平台承接细胞周期检测、增殖检测、凋亡检测等流式实验外包,拥有上千例流式实验的经验,实验快周期短,是您科研路上的铁哥们儿哦!


   凋亡细胞在形态上可见与周围细胞脱离接触,细胞变圆,细胞膜向内皱缩、胞浆浓缩、内质网扩张、细胞核固缩破裂呈团块状或新月状分布、内质网和细胞膜进一步融合将细胞分成多个完整包裹的凋亡小体,凋亡小体zui后被吞噬细胞吞噬消化。在凋亡过程中细胞内容物并不释放到细胞外,不会影响其它细胞,因而不引起炎症反应。

   OK,话不多说我们来看看有哪些注意事项吧。

   1、诱导培养检测凋亡的细胞的时间要准确

   1、旋帽离心管装的试剂在开盖前需要短暂离心,将盖内壁上的液体用至离心管底,尽量避免开盖时液体洒落出来。

   2Annexin V-FITCPropidium iodide是光敏物质,流式检测保存与操作时请注意避光。

   3Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,所以实验过程中一定要注意保护好自己裸露在外的皮肤,戴好手套。


   4、在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留影响实验结果。

   5PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC热色,上机前5分钟再加入PI热色。

   6、整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。

   7.荧光显微镜下观察细胞时,由于荧光易碎灭,观察时要尽量快。反应完毕后尽快检测,因为细细胞凋广检测是一个动态的过程,反应1小时后荧光强度就开始衰变。

   8、成功的检测凋亡受以下几种因素的影响,如细胞类型、细胞膜上PS的密度、发生凋亡时PS翻转的比例、诱导细胞凋亡的方法、所用试剂、诱导凋亡的时间等,把这些影响因素进行优化对实验成功是非堂必要的。
   那么用流式进行细胞凋亡检测实验操作中的注意事项我们就讲完了,科研很累但是做对了结果很美,还有其他的主义是系那个需要补充·或者有不懂问题的可以给客服留言技术会及时回复您的,如果您有细胞凋亡检测生物实验外包相关的实验需求普拉特泽永远在线哦~