非酒精性脂肪肝病(NAFLD)动物模型的造模时间是实验成功的关键因素。普拉特泽生物动物平台可承接各种动物实验外包服务，包括检测裸鼠皮下成瘤、小鼠肠炎模型构建、糖尿病模型等实验外包服务，本文是我们在承接数动物实验中，对操作过程中的常见问题与大家留言咨询最多的问题进行回答，快来收藏吧！

本文将详细介绍不同类型NAFLD模型的最佳造模时间，帮助研究者准确掌握从单纯性脂肪肝到NASH、肝纤维化的进展周期。

一、常见NAFLD模型造模时间对比

1. 单纯性脂肪肝研究(Steatosis)

①推荐模型：普通高脂饮食(HFD)

②最佳时间：6-8周

③特征：肝细胞脂肪变性(油红O染色阳性)

④轻度ALT升高(约1.5-2倍)

④无显著炎症或纤维化

2. NASH(脂肪性肝炎)研究

⑴推荐模型：HFHC或MCD饮食

⑵最佳时间：

HFHC：12-16周

MCD：3-4周

特征：

NAS评分≥4分

明显炎症浸润(HE染色)

TNF-α、IL-6等炎症因子升高

3.肝纤维化研究

推荐模型：HFHC+HFD或CCL4联合

最佳时间：

HFHC：20-24周

HFD+CCL4：8-12周

特征：

天狼星红染色阳性

α-SMA表达增加

羟脯氨酸含量显著升高

二、影响造模时间的关键因素

1.动物品系差异

⑴C57BL/6小鼠：最常用，对高脂饮食敏感

⑵SD大鼠：需要更长时间(通常比小鼠延长30-50%)

2.饮食配方差异

⑴脂肪含量(40% vs 60%)

⑵是否添加胆固醇(显著加速NASH进展)

⑶是否联合果糖/葡萄糖水(加重代谢异常)

3.环境因素

⑴温度(最佳22±2℃)

⑵光照周期(建议12h/12h)

⑶饲养密度(每笼不超过5只)

三、造模成功的判定标准

1.基本标准

肝指数(肝重/体重)增加20%以上

血清ALT>50 U/L

肝脏TG>10 mg/g组织

2.组织学标准

油红O染色阳性面积>20%

NAS评分≥3分(脂肪变性1-3分+炎症0-3分+气球样变0-2分)

3.分子标志物

TNF-α水平升高2倍以上

α-SMA阳性细胞数增加

五、实验设计建议

1.时间点设置

至少设置3个时间点(如4、8、12周)

处死前禁食6小时(不禁水)

2.样本量计算

每组至少8-10只动物

考虑20%的损耗率

对照设置

正常饮食对照组

模型对照组

阳性药物对照组(如适用)

六、常见问题解答

Q：为什么我的HFD模型8周还没有明显脂肪变性？

A：可能原因：

动物品系不敏感(建议用C57BL/6)

饲料脂肪含量不足(建议≥45%)

环境温度过高(影响代谢)

Q：MCD模型体重下降严重怎么办？

A：解决方案：

缩短造模时间(2-4周)

改用MCS(胆碱缺乏但含蛋氨酸)饮食

增加监测频率(每周2次称重)

Q：如何判断纤维化是否形成？

A：金标准：

天狼星红染色(胶原沉积)

羟脯氨酸含量测定

肝硬度检测(如FibroScan)

七、总结与展望

掌握NAFLD模型的精准造模时间是研究成功的关键。根据研究目的：

单纯脂肪肝：HFD 6-8周

NASH：HFHC 12-16周

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纤维化：HFD+CCL4 8-12周