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实验介绍
【技术原理】
流式利用不同荧光物质标记的单克隆抗体，与待测成分作用，然后上流式细胞仪检测待测细胞。待测细胞随流动室内的流动鞘液排列成单列，一个个迅速通过激光聚焦区，激光在对每个细胞进行照射时可同时得到前向角散射和侧向角散射2种散射光以及激发荧光标记物发出的信号，利用这些信号，可计算出相对含量，从而得到细胞群的相对比值。
调节性T细胞（Tregs）是免疫系统中的必需细胞，可抑制其他细胞的免疫反应，旨在限制过度反应并防止自身免疫。Tregs以CD4，CD25和Foxp3的表达为特征，而缺少CD127。CD4 + Foxp3 +调节性T细胞已被称为“天然存在”的调节性T细胞，以将其与体外产生的“抑制性” T细胞群体区分开。
辅助性T细胞(Follicular helper T cells,Tfh细胞)为生发中心产生亲和力成熟的B细胞提供了必不可少的帮助。通过许多标准，它们可与其他T辅助细胞类型区分开，包括转录因子BCL-6和CXCR5的表达，CXCL13的受体将Tfh细胞募集到卵泡。它们的功能也是独特的，因为它们通过产生IL-21（一种辅助细胞因子，可有效刺激B细胞分化为抗体形成细胞）来提供与Th2细胞不同的B细胞帮助。
滤泡调节性T细胞(Follicular regulatory T cells,Tfr细胞)在分化早期，细胞因子受体及其它共刺激/共抑制信号协同启动了Treg细胞向Tfr细胞的分化信号，此信号的集合最终诱导Treg表达转录因子Bcl-6及趋化因子受体CXCR5，分化为早期Tfr细胞。
白细胞介素35 (interleukin-35,IL-35)为IL-12家族的新成员，是由p35和Ebi3以共价键相结合形成的异源二聚体，主要通过抑制Thl7细胞分化和促进调节性T(Treg)细胞增殖在多种疾病的免疫调控中发挥免疫抑制作用。iTr35细胞为IL-35诱导产生的一种新型诱导性Treg细胞亚群，具有长期的功能稳定性.因此,iTr35细胞和IL-35在免疫调控中具有重要作用。
我们常用的检测指标：CD4、CD25、FoxP3、CXCR5、IL-35。
【实验流程】
组织：制成单细胞悬液-溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的标记抗体-孵育-离心去上清-上机
血液：溶血-离心去上清-调整细胞密度-加入相应的表面标记抗体-孵育-离心去上清-上机
案例展示
注意事项
血液样本量需提供5-10ml。
送检与交付标准
| 样品类型 | 样品需求 | 运输条件 |
|---|---|---|
| 组织 | 离体后组织制成单细胞悬液，加入PBS培养基内 | 常温运输 |
| 活细胞 | 样本量：1*106个细胞/TEST，加入PBS培养基内 | 常温运输 |
| 血液 | 将血液采集在EDTA肝素钠的抗凝采血管内 | 常温运输 |
电话：400-691-6686
在线时间：8:00-24:00
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