油红O染色实验步骤与注意事项脂肪染色实验步骤由普拉特泽生物为大家分享。普拉特泽生物病理实验平台为广大科研人员提供长期稳定的油红O染色实验外包服务，欢迎咨询。本文给大家简单介绍一下油红O脂肪染色实验的详细操作步骤：

        一、油红O染色实验准备

        1、仪器耗材：生物组织摊烤片机、3DHISTECH扫描仪、显微镜、盖玻片、载玻片

        2、染色试剂：普拉特泽改良油红O染色液、甘油明胶、无水乙醇、二甲苯

        3、待测组织的冰冻切片

        二、油红O染色实验步骤

        1、冰冻切片厚度6～10 µm，不固定或10%福尔马林固定10 min后水洗。

        2、切片入蒸馏水中稍冲洗。

        3、切片入70%的乙醇内浸洗20～30 s。

        4、切片入改良油红O染色液中(加盖)，密闭染色10～15 min。

        5、分色：入70%的乙醇内稍洗以便去除染液。

        6、入蒸馏水中稍微清洗。

        7、苏木素染色液复染核1～2 min。

        8、(可选)1%的盐酸溶液稍微分化一下。

        9、(可选)自来水漂洗10 min或稀碳酸锂溶液中促蓝。

        10、入蒸馏水中稍微清洗。

        11、用滤纸吸干周围水分。

        12、甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。

        三、油红O染色注意事项

        1、石蜡切片不能用于油红O染色，原因在于石蜡包埋过程中需要脱水，脱水过程中需要乙醇-二甲苯和石蜡，二甲苯是有机溶剂，会把中性脂肪溶解；、

        2、 冰冻切片准备时，包埋的降温过程建议选择干冰，原因在于若选择液氮降温过程较强烈，可能导致组织内部炸裂，而干冰降温的过程比较缓和，染出来的片子比较好看；

        3、切片的厚度要稍微厚一些，建议选择8-10 μm；

        4、实验设计建议设计阴性对照和阳性对照，如阳性对照可以用脂质丰富的肝脏组织等，阴性对照可以根据文献来选择无脂肪沉积的组织。

        好啦，那关于油红O脂肪染色实验步骤和注意事项小编就简单介绍到这里啦，还有什么不懂得可以直接留言哦，小编会随时查看将您的问题咨询技术后写成技术答疑供大家一起学习进步哟~欢迎留言！