大家好！今天普拉特泽生物继续带大家一起学习新实验——油红O染色实验，油红O染色是一种用于检测脂肪油滴的染色方法。它的原理基于油红O染料与脂肪油滴之间的亲和性。普拉特泽生物病理实验平台长期为大家提供红油O染色代做外包服务，本文跟大家分享油红O染色实验指南。


实验原理

油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，较易与甘油三脂结合呈小脂滴状，与磷脂结合力稍差。其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰冻切片内脂质的溶解度较在原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色，具体颜色因脂质浓度而定。因此，油红O染色方法可用于检测组织或细胞中脂肪油滴的存在和数量，尤其适用于脂质代谢疾病的研究。

如果您想进行油红O染色实验，以下是一些指南：

        准备标本：您可以选择使用细胞或组织样本。确保您的样本是新鲜的，保存在冰箱或液氮中。

        固定标本：将样本用4％的多聚甲醛或其他合适的固定剂进行固定，保证固定剂浓度充足并确保完全固定。

        化学处理：将固定的标本进行化学处理，以去除其内部的脂质和其他物质。其中的一种方法是将样本用80％的乙醇浸泡24小时。

 
        染色：在油红O染色液中将标本浸泡，时间可以根据需要自行决定，一般在30分钟至2小时之间。将标本移入去离子水或其他适合的缓冲液中冲洗，使其达到理想的染色效果。

        显微镜检查：将标本放在显微镜下检查。您应该能够看到样本中的脂肪油滴，它们应该呈现出红色。

        请注意，油红O染色实验不仅适用于脂肪的检测，也可以用于一些其他的实验和研究。

        接下来我们具体看看是怎样的实验步骤，以c57小鼠的肝脏组织为例，将实验分为对照组和高脂模型组

 对照组      

模型组

将得到的实验结论

中性脂肪：橙红色或橘红色

细胞核：蓝色

具体的实验步骤

        1、冰冻切片厚度6～10µm，不固定或10%福尔马林固定10min后水洗。

        2、切片入蒸馏水中稍冲洗。

        3、切片入70%的乙醇内浸洗20～30s。

        4、切片入改良油红O染色液中(加盖)，密闭染色10～15min。

        5、分色：入70%的乙醇内稍洗以便去除染液。

        6、入蒸馏水中稍微清洗。

        7、Mayer苏木素染色液复染核1～2min。

        8、(可选)1%的盐酸溶液稍微分化一下。

        9、(可选)自来水漂洗10min 或稀碳酸锂溶液中促蓝。

       10、入蒸馏水中稍微清洗。

       11、用滤纸吸干周围水分。

       12、甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。

       13、采图。（染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相）

今天关于红油O染色的实验指南就分享到这儿啦~如果您在实验过程中遇到技术问题，或者需要实验外包和代做，可与我们技术老师联系：18570028002（微信同号）