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细胞侵袭实验步骤

2023-06-08 16:31:49

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台


大家好,上期的我们讲了关于什么是细胞侵袭实验,并梳理了在进行细胞侵袭实验前的准备


今天,我们一起来看看细胞侵袭实验步骤~


细胞培养:在进行细胞侵袭实验之前,需要先在培养皿中培养细胞,维持细胞的生长和活性。通常情况下,细胞应该在37℃,5% CO2的环境中进行培养。对于不同类型的细胞,培养的方式,培养液配方也各不相同,需要在实验设计时具体考虑。


细胞处理:细胞处理通常是为了模拟一些特定情况下的细胞状态,用以研究某种因素或生物过程的影响。如,在研究肿瘤细胞的侵袭能力时,可以通过RNA干扰或药物处理等方法,使细胞基因表达发生改变,使细胞的侵袭能力增强或降低。


制备Transwell装置:Transwell装置一般由一个上部的小孔膜和一个下部的培养皿组成,中间被隔膜隔开。在Transwell装置的孔膜中有很多小孔洞,可以让细胞穿过,向下侵袭。在做实验的时候,需要先将Transwell装置插入到96孔板中,然后放入特定的培养液。


细胞移植:将处理好的细胞悬液加入到Transwell孔膜中,通常会在悬液上面涂上一层Matrigel,Matrigel可以为细胞提供支架和生长因子,有助于细胞向下侵袭。然后将Transwell装置放入孵化器中,让细胞有充分时间穿过Transwell孔膜,向下侵袭。


细胞染色:在细胞侵袭结束后,取出Transwell装置进行染色。一般情况下,可以使用甲醛固定细胞,并采用一些细胞核染色剂如DAPI、Hoechst、Giema等对细胞进行染色。染色后,将Transwell装置反过来放在显微镜下,观察和记录细胞数目和形态,评价细胞侵袭能力。


数据统计和分析:通过统计和分析得到的数据,可以评估细胞的侵袭能力和干预手段的效果。比如,可以通过统计穿过Transwell孔洞的细胞数目、母细胞和子细胞之间的形态学差异等,进行所得数据的初步分析。


细胞侵袭实验中每一步都需要仔细操作,尽可能地控制实验的误差,以确保最终结果的准确性和可靠性。


好啦,细胞侵袭实验步骤咱们就介绍完啦,如果您也对细胞侵袭实验感兴趣或正在准备细胞侵袭实验的话欢迎随时咨询普拉特泽生物~