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细胞培养基的理化性质和基本成分【细胞实验外包】

2022-08-25 14:58:48

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

  大家好,今天普拉特泽生物为大家介绍的是细胞培养基的理化性质和基本成分普拉特泽生物——细胞实验平台不仅可以承接代做细胞实验外包更有自己的细胞库可以购买细胞,而培养基不管是在细胞实验中还是在细胞的培养传代中最重要的外在因素,因此技术专门为大家出一期关于培养基的理化性质和基本成分来帮助大家了解和挑选培养基。

细胞在培养基中,不仅能够存活,还要分裂增殖,因此合适的渗透压,PH值、温度等理化性质是细胞培养基必须具备的前提条件咱们一个一个看:

1、PH值
大多数动物细胞的适宜PH在7.2~7.4之间;一些正常的成纤维细胞系却在PH7.4~7.7之间生长较好,而一些转化细胞可能在PH7.0~7.4之间生长较好。细胞培养基的PH值通常依靠细胞培养基中的酚红指示剂来判断,不同的PH,培养基会呈现不同的颜色变化,PH7.8时,呈现紫色,PH7.6呈现桃红色,PH7.4呈现红色,PH7.0呈现橘红色,PH6.5时呈现柠檬黄色。

2、缓冲能力

细胞培养基应具有一定的缓冲能力。细胞代谢过程中产生的CO2是造成细胞培养基PH值波动的主要原因,在封闭式培养过程中CO2与水结合产生酸,细胞培养基PH值很快下降;打开培养器皿时CO2逸出则会引起PH值升高。NaHCO3-CO2缓冲系统是细胞培养基中最常用的缓冲系统,此外磷酸盐缓冲系统也可以获得缓冲能力,相比碳酸盐缓冲系统其能力较低,但因其对细胞毒性小,成本低,在细胞培养中也得到广泛应用。还有一种较为常用的缓冲液是HEPES(羟乙基哌嗪硫磺酸)液,它是一种非离子两性缓冲液,在PH7.0~7.2范围内具有较好的缓冲能力,在细胞培养基中添加合适浓度的HEPES,可以较好地控制PH值在适宜的范围内,然而高浓度的HEPES可能对细胞有毒性作用,所以在细胞培养时添加的浓度一般为10-25mmol/L.

3、渗透压

细胞必须生活在等渗的环境中,大多数体外培养的细胞对渗透压有一定的耐受性。人血浆渗透压约为290 mOsm/kg,可视为培养人体细胞的理想渗透压。鼠细胞的渗透压在320 mOsm/kg左右。研究显示,对于大多数哺乳动物细胞,渗透压在290-320 mOsm/kg的范围内都适宜。在生产、配制细胞培养基的过程中,渗透压的测定可以防止在生产中出现称量错误。

4、温度

温度对培养基有较大的影响。较高的温度可引起营养成分的降解或破坏,细胞培养基的PH值,离子强度和电解常数等都可能会受到影响。

细胞培养基必须含有充分的营养物质,满足完成新细胞合成、细胞代谢等生物反应所需要的物质和能量。细胞培养基的主要成分有水,氨基酸,维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助营养物质。传统的合成细胞培养基在使用时还需要添加一定量的血清才能促进细胞生长和繁殖。低血清细胞培养基或无血清细胞培养基则是在合成细胞培养基的基础上,通过调整营养成分配比和含量,或添加一些血清代替因子,来满足细胞在低血清或无血清状态下的生长需求。

1、水

水不仅是细胞的主要成分,也是细胞赖以生存的主要环境,营养物质、代谢产物都必须溶解在水中,才能被细胞吸收和排泄。细胞培养基中90%以上的成分是水。在配制细胞培养基时,需要用到新鲜制备的超纯水,不同地区水质可能偏酸或偏碱,在配制细胞培养基时,pH需要调节到适宜的范围。

2、能源和碳源

能源和碳源主要用于维持细胞生命和支持细胞生长,主要包括糖,糖酵解的产物和谷氨酰胺,其他氨基酸是次要的能源和碳源物质。目前大多数细胞体外培养时都会选择葡萄糖作为主要碳源和能源。

3、氮源

不同细胞对氨基酸的需求各异,一些必须氨基酸在细胞中不能合成,比如组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、精氨酸及谷氨酰胺等,在细胞培养基中添加的浓度较高,尤其是谷氨酰胺对细胞生长的影响非常大,许多对谷氨酰胺依赖性较强的细胞甚至需要在培养基的基础浓度上额外添加。而非必须氨基酸,细胞可以自己合成或通过其他物质转化得到,也需要在培养基中添加适当浓度来减轻细胞在合成方面的负担。

 4、维生素

维生素是维持细胞正常生理状态的一种重要的活性物质,对细胞代谢有重要作用,但是在不同配方的培养基中浓度差异较大。

 5、无机离子

无机盐是细胞维持生命活动所不可缺少的营养成分。无机离子主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、CI-、PO43-、SO42-、HCO3-等,维持细胞培养基渗透压平衡,参加细胞的活动代谢。在细胞培养过程中,各种离子会起到不同的作用,不同细胞对离子浓度的需求也会有差异。保持培养基中离子浓度的稳定以及各种离子间的平衡具有重要意义。
        好啦,那关于细胞培养基的介绍我们就讲完啦,如果您也想要培养细胞或细胞实验需要外包、买细胞的话都可以直接留言哦,普拉特泽生物细胞平台的技术门斗欢迎跟大家进行技术上的交流~