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外泌体鉴定的三个标志与应用

2022-12-21 16:50:22

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台


        外泌体鉴定的三个标志与应用的注意事项由普拉特泽生物分享,外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,是生物医学和分子生物学的重点研究对象。普拉特泽生物分子检测平台长期从事外泌体研究,提供外泌体提取纯化鉴定等外包服务,欢迎各位基础科研人员随时咨询~

        据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2014年的提议,外泌体鉴定3个标志:透射电镜(transmission electron microscope,TEM)、粒径(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白标志物(Western Blot, WB)。

        1、透射电镜(TEM

        外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm,适合外泌双层囊膜超微结构观察,可观测样本中是否存在外泌体样结构(通常为茶托型或一侧凹陷的半球形,如图1),同时可测量外泌体大小。

        2、粒径(NTA

        该方法能保证外泌体原始状态、检测速度快,检测后能提供外泌体粒径和浓度信息。

        3、蛋白标志物(WB

        外泌体Western blot检测可含内参检测,外泌体中的β-Actin的表达丰度相对于正常细胞样品中的较低,外泌体WB检测时可能会检测不到任何条带或者条带微弱。

        外泌体在分子生物学方面的应用如下:

        1、外泌体作为药物载体,实现靶向给药。外泌体具有负载“货物“并将其传递给靶细胞的能力, 输效率高、稳定性好和靶向性强以及能跨越血脑屏障等独特优势。外泌体也适合递送各种化学物质、蛋白质、核酸等。Buller B等将负载 miR-146的外泌体注射至患有角质细胞瘤小鼠的肿瘤部位,发现miR-NAs有效的抑制了肿瘤的生长。

        2、疾病诊断的分子标志物。不同疾病的不同类型细胞都能分泌含有不同miRNAs和RNAs的外泌体,使得从病人的体液中分离外泌体作为疾病诊断成为可能,尤其在肿瘤诊断中。除此之外,外泌体还可以应用于非肿瘤疾病的诊断。Welker M W等研究发现血清外泌体CD81可能是慢性丙型肝炎诊断的潜在蛋白标志物。

        3、促进组织修复和再生。近年的研究发现,干细胞来源外泌体是干细胞旁分泌活动的一种重要方式,可介导其促进组织再生。Chen等发现,ADSCs-exo 的联合治疗可减少大鼠急性缺血性卒中的梗死面积,促进神经功能恢复。ADSCs-exo可以避免干细胞治疗的免疫排斥、伦理问题等缺点,且具有高稳定性、易于储存、无需增殖、便于定量使用等优势,与单一的细胞因子比较,具有较高的安全性和更大的组织再生潜能。

        外泌体鉴定的三个标志和外泌体应用咱们就讲到这里啦,如果您还有什么其他的问题或有外泌体实验外包的需求欢迎随时咨询——普拉特泽生物


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