TTC染色详细计算分析过程由普拉特泽生物分子检测平台总结分享，分子检测平台为广大科研实验人员提供TTC染色实验服务，先一起来学习学习什么是TTC染色吧！

TTC染色详细计算分析过程，那可是个科研小能手必备的技能！下面，就让普拉特泽生物来为你揭秘吧！

一、TTC染色计算分析步骤

1）前期准备

在进行TTC染色之前，得确保实验材料、试剂和仪器设备都准备妥当。这包括新鲜的脑组织样本、2%红四氮唑溶液（TTC染色液）、PBS溶液、10%中性甲醛固定液，还有病理图文分析系统等。

二、染色步骤

①‌取脑与切片‌：麻醉实验动物后，迅速取脑，并置于0-4℃的PBS溶液中转移。然后，将脑组织切成2mm厚的薄片，准备进行染色。

‌②染色‌：将切好的脑组织薄片放入2%红四氮唑溶液中，37℃避光水浴30分钟。期间，每5分钟轻微晃动容器，使切片充分染色。

‌③洗涤与固定‌：染色完成后，取出脑片用PBS溶液洗涤3-5分钟。然后，用10%中性甲醛固定脑片6小时，以便后续观察和分析。

三、计算分析

‌⑴图像采集‌：选择每一切片的尾侧面，用高分辨率相机或病理图文分析系统拍摄染色后的脑组织切片。确保图像清晰、色彩对比鲜明。

‌⑵图像分析‌：将拍摄好的图像导入病理图文分析系统，进行图像分析。首先，进行纯黑或纯白背景转换，以便更好地识别梗死区域和正常区域。
然后，调整颜色通道（如HSI通道），设定梗死区域的颜色范围（如H:0-255；S:0-45；I:150-255）。
接着，用吸管工具点击切片位置，选取梗死区域和正常区域。最后，创建预览图像，并保存原始图片数据和分析处理步骤的结果。

⑶梗死面积与体积计算‌：在病理图文分析系统中，测量每片切片的梗死面积和总面积。梗死体积为该层梗死面积和层厚的乘积。将各层的梗死体积相加，即可得到总的梗死体积。
记得根据实验需求，设定面积选择大小的范围（如1000-1000000平方像素）。

‌⑷数据导出与统计分析‌：将计算得到的数据导出为Excel或CSV格式，以便进行后续的统计分析。统计总体面积与梗死面积，对比不同实验组之间的差异，得出实验结论。

四、注意事项

标本越新鲜越好，动物麻醉后取材需迅速，如不马上做实验，可先将样本放入-20℃速冻台再转入-80℃储存，但样本千万不要固定。

孵育液（TTC染色液）需提前30分钟放入37℃水浴或温箱中预热。

染色后的标本浸存于4%多聚甲醛中易褪色，应避光保存最多一周时间。

在进行图像分析和计算时，要确保操作准确、无误，以免影响实验结果。

怎么样？TTC染色详细计算分析过程是不是既科学又严谨呢？希望这篇文章能帮到你，让你在科研道路上更加得心应手！

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