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shRNA载体构建有哪些不同类型?

2023-09-11 16:11:26

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

  shRNA载体构建的不同类型由普拉特泽生物工具实验平台为大家总结分享。普拉特泽生物为广大科研人员提供长期稳定的shRNA载体构建外包实验服务,本文给大家分享咱们技术长期总结下来的shRNA载体构建的不同类型。

短发夹RNA(shRNA)是一种有效的基因敲降技术,通过诱导靶mRNA的降解或抑制其翻译,能够在细胞水平上研究基因功能和验证基因治疗策略。为了有效地应用shRNA,需要将其包装在合适的载体中,以便准确、稳定地传递到目标细胞。本文将介绍shRNA载体构建的不同类型及其特点。


首先是基于病毒的载体

基于病毒的载体是shRNA最常用的传递系统,主要包括慢病毒、腺病毒、痘病毒等。这些载体具有较高的感染效率和稳定的表达性能,适用于体内和体外实验。

慢病毒载体是一种逆转录病毒,可感染非分裂细胞,如神经元和肝细胞等。其优点在于可以感染非转录细胞,并能够整合到宿主基因组上,长期稳定表达shRNA。腺病毒载体是一种缺陷型病毒,需要辅助病毒才能完成复制。其优点在于可以感染分裂和非分裂细胞,并能在短时间内迅速表达shRNA。痘病毒载体可以在多种细胞中复制和表达,但一般不适用于神经元。

在选择基于病毒的载体时,需要考虑感染效率、免疫原性、安全性和基因组整合等问题。此外,这些载体的制备和纯化过程较为复杂,可能影响实验结果的一致性和可靠性。

其次是基于非病毒的载体

基于非病毒的载体包括脂质体、纳米颗粒、阳离子聚合物等,适用于体内和体外实验。这些载体能够通过包裹、吸附或化学键合等方式携带shRNA,并通过细胞膜的主动或被动机制进入细胞。

脂质体是一种由脂质分子组成的双层膜结构,可以包裹shRNA并通过细胞膜上的脂质分子进行内吞作用进入细胞。纳米颗粒载体是利用纳米技术将shRNA分子封装在无机或有机材料制成的颗粒中,通过细胞膜的吞噬作用进入细胞。阳离子聚合物是一种带正电荷的线性高分子,能与带负电荷的shRNA分子形成复合物,并通过细胞膜上的负电荷进行内吞作用进入细胞。

基于非病毒的载体具有制备简单、安全性和免疫原性较低等优点。然而,它们的效率和稳定性较基于病毒的载体低,有时需要化学修饰以提高细胞摄入效率和稳定性。


最后的结论

shRNA载体构建是实现基因敲降技术的重要步骤之一。在选择shRNA载体时,需要根据实验需求和限制因素综合考虑,如感染效率、免疫原性、安全性和制备难度等。对于特定应用场景,可以针对性地优化和选择适合的载体类型以提高实验结果的可控性和可靠性。在未来的研究中,需要进一步探索新型的shRNA载体和优化策略,以适应更多种类的细胞和实验需求。

好啦, shRNA载体构建的不同类型我们就简单介绍到这里啦,同学们有没有一个简单的了解呢?不懂得可以给客服留言技术给您详细解答。下一篇再详细为大家介绍shRNA载体构建实验的详细过程,普拉特泽生物誓让大家透彻shRNA载体构建的过程。当然若果您有shRNA载体构建方法或其他医学科研实验外包的需求,欢迎随时咨询