实验用的植物组织蛋白样本怎样提取出来?
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Question:实验用的植物组织蛋白样本怎样提取出来?(普拉特泽生物长期提供稳定专业的生物医学实验外包服务)
有两种方法,方法一针对SDS-PAGE,垂直板电泳,步骤如下:
1、根据样品重量(1g样品加⼊3.5ml提取液,可根据材料不同适当加⼊),准备提取液放在冰上。
2、把样品放在研钵中⽤液氮研磨,研磨后加⼊提取液中在冰上静置(3-4⼩时)。
3、⽤离⼼机离⼼8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
4、提取上清夜,样品制备完成。
方法二是⽤三氯醋酸—丙酮沉淀法,离⼦浓度⼩的1、在液氮中研磨叶⽚,步骤如下:
1、加⼊样品体积3-204℃8000rpm以上13、的β-巯基⼄醇),摇匀后离⼼(4℃8000rpm以上14、上样前加⼊裂解液,室温放置30分钟,使蛋⽩充分溶于裂解液中,然后离⼼(15℃8000rpm以上1⼩时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待⽤。
2、⽤Brandford法定量蛋⽩,然后可分装放⼊-80℃备⽤
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