石蜡切片制作常见问题与解决方法【上】
来源/作者:普拉特泽-病理染色技术平台
石蜡切片制作常见问题与解决方法由普拉特泽生物总结分享,石蜡切片不仅用于观察正常细胞和组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究主要方法。
普拉特泽生物病理平台代做各类组织样本石蜡切片上万例。石蜡切片虽简单,却也是很不容易掌握的,有时很容易成功,有时则由于某种因素而造成切片的质量低劣,甚至完全失败。下面就跟大家一起分享这些制作过程中容易遇到的问题和解决的方法:
问题一、切片上卷且不能形成连续蜡带
原因:
1、切片刀不够锋利。
2、切片刀与蜡块的角度不当。
3、’蜡块四周留蜡边太少。
4、石蜡硬度过大,黏度不够。
解决方法:
1、更换新的切刀片。
2、调整切片刀的角度。
3、可重新包埋或将蜡块四周熔化,再放入包埋框中补蜡,修理蜡块时组织块周围保留的石蜡以2mm左右为宜。
4、蜡块过硬可适当加些蜂蜡,或更换熔点较低的石蜡重新包埋。
问题二、切片弯曲且不能形成直带
原因:
1、蜡块上下或左右两边不平行。
2、蜡块与切片刀刀口不平行。
3、组织块外形不整齐。
4、切片刀各处的锋利程度不一致。
解决方法:
1、蜡块四边反复修平对称。
2、调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。
3、修整组织块时,注意修切整齐。
4、移动切片刀,更换刀口位置。
问题三、切片上出现裂纹
原因:
1、切片刀上有小缺口或刀口不平整。
2、组织中可能含有较硬的物质,如固定液的结品石灰质。
3、包埋时石蜡冻结太慢。
解决方法:
1、切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新更换切刀片。
2、组织中硬性物质太多,则不宜用
3、待蜡块周围凝结成一层,即放入冷水中。
问题四、切片粘在切片刀上或蜡块上且不易取下
原因:
切片时有静电作用,产生静电吸引,在冬季或气候干燥时常出现这种情况。
解决方法:
可用加湿器,以增加空气中的水分,而减少静电作用。
问题五、切片厚薄不均
原因:
1、片微动部分失灵,齿轮跳格。
2、蜡块太大,过硬,转动时刀刃受震动。
解决方法:
1、修理切片机失灵的部分,调整理施,加机油润滑零件,必要时需请专业技术人员调整切片 机。
2、如蜡块过大,取材时注意取材的大小。蜡块组织过硬,可放回水中浸泡,再重新脱水和包埋。
问题六、切片碎烂或组织脱出并与石蜡分离
原因:
1、组织脱水,透明不够。
2、浸蜡时间过长;温度过高。
3、组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中,故导致石蜡与组织分离。
4、二甲苯存放时间过久。
解决方法:
1、按组织大小选择脱水、透明时间。
2、依据组织的性质和结构特点确定浸蜡时间和包埋温度。一般这种情况后期难以补救
3、重新融化,退回入二甲苯和酒精,再进行渗蜡包埋。
4、更换二甲苯。
好啦,那关于石蜡切片操作的常见问题以及解决方法上篇我们就介绍到这里啦,下期分享石蜡切片常见问题解决方法下篇,还遇到了其他问题的同学可以留言,普拉特泽会一一回复的哦~我们下期见!