石蜡切片染色不均匀模糊怎么办?
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
Question:石蜡切片染色不均匀、模糊怎么办?(普拉特泽生物提供长期稳定的石蜡切片代做外包服务)
答:组织切片染色分析是观察组织结构的常用方法。新鲜组织中一般含有水分,经过石蜡包埋处理后石蜡会代替组织中的水分,从而可以长期保存组织和细胞的结构,制成切片后可以在显微镜下直接观察组织情况。那么常见的石蜡切片染色不均匀和模糊的原因和处理如下:
(1)组织未及时固定。新鲜的组织取材如果后如果没有及时固定容易因为挤压或其他原因变形影响组织形态,取材后应该尽快固定。
(2)组织脱蜡不彻底。组织内有残存的石蜡会影响染色液的着色效果,一般有在二甲苯中脱蜡时间不足或二甲苯质量问题浓度降低两个原因,所以要针对不同的组织查阅文献和染色步骤中的组织脱蜡时间,在二甲苯中浸泡足够时间脱蜡和定期检查更换实验室内的二甲苯溶液。
(3)组织脱水不彻底。组织内如果有残留的水分也会影响染色液的着色效果,酒精脱水时严格按照梯度酒精脱水步骤进行(不同组织乙醇浸泡时间不同),脱水完毕后封片速度要快;实验室定期检查脱水酒精浓度,做好密封防止酒精蒸发水分吸收酒精浓度降低影响脱水效果。
(4)组织浸蜡温度过高。浸蜡时温度必须控制在62 ℃~64 ℃。
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