深入了解MASSON染色:原理、步骤与实例
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
MASSON染色是一种在组织学和病理学研究中广泛应用的染色技术,主要用于显示和区分组织中的胶原纤维和肌纤维。这种染色方法以其独特的原理和步骤,为我们提供了观察和解析组织微观结构的有力工具。 MASSON染色实验由普拉特泽生物病理检测平台总结分享,病理检测平台为广大科研实验人员提供MASSON染色实验等其他染色实验服务,先一起来深入了解MASSON染色:原理、步骤~
一、MASSON染色的原理
MASSON染色的原理主要基于阴离子染料分子的大小和组织渗透性的关系。染料分子的大小决定了其能够渗透进入的组织类型。小分子量的染料能够穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量的染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。在MASSON染色中,由于肌纤维间隙较小,丽春红等小分子染料能够渗透其中并染色,使其呈现红色;而胶原纤维间隙较大,大分子量的苯胺蓝等染料能够进入并染色,使其呈现蓝色或绿色。这种染色方式使得我们能够清晰地观察到并区分这两种不同的组织成分。
二、MASSON染色的步骤包括:
Step1:石蜡切片脱蜡至水,使组织切片能够充分与染色剂接触。
Step2:进行铬化处理或去汞盐沉淀,这一步对于甲醛固定的组织可以省略。
Step3:使用自来水和蒸馏水依次清洗切片,去除多余的处理液。
Step4:使用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核,使细胞核着色。
Step5:充分水洗切片,如过染可用盐酸酒精分化,以调整染色深浅。
Step6:使用Masson丽春红酸性复红液染色,使肌纤维呈现红色。
Step7:使用2%冰醋酸水溶液浸洗切片,以优化染色效果。
Step8:使用1%磷钼酸水溶液分化,使胶原纤维和其他组织成分区分更明显。
Step9:使用苯胺蓝或光绿液染色,使胶原纤维呈现蓝色或绿色。
Step10:再次使用0.2%冰醋酸水溶液浸洗切片,使色调更加清晰鲜艳。
Step11:最后,通过酒精脱水、二甲苯透明和中性树胶封固等步骤,完成整个染色过程。
三、以下是一个Masson染色的示例过程:
→预处理:获取包含组织的石蜡切片,确保切片已经去蜡并准备好染色。
→染色处理:
①将去蜡的切片放入预热的酸性fuchsin溶液中,将其染成红色。根据实验需求,可以调整染色时间和温度。
②使用盐酸或酸性乙醇溶液对切片进行漂洗,以去除多余的染料。
③将切片放入苏木精溶液中,使细胞核和肌肉呈黄色或淡绿色。
④脱水和固定:将切片放入逐渐增浓度的酒精溶液(例如70%、95%、100%)中,逐渐脱水。然后,将切片放入透明剂中(如井田氏溶剂),使其透明并固定。
⑤封片和观察:将切片放在载玻片上,加入透明封片剂,并盖上玻片。使用显微镜观察和分析染色后的组织切片,注意观察胶原纤维的红色染色和细胞核及肌肉的颜色。
人肾组织
小鼠纤维化
总之,MASSON染色是一种重要的组织学染色方法,通过其独特的染色原理和步骤,可以实现对组织纤维结构的清晰展示和深入分析。在实际应用中,MASSON染色为医学研究和临床诊断提供了有力的支持。
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