考马斯亮蓝染色原理与传统染色
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
考马斯亮蓝染色液配方是生物化学实验中常用的配方之一,掌握它对于进行蛋白质检测至关重要。
普拉特泽生物组织染色检测平台为广大科研实验人员提供考马斯亮蓝染色外包实验服务,以下将详细介绍考马斯亮蓝染色液的配方及其配制步骤,帮助您轻松掌握实验技巧。
●配方组成
①考马斯亮蓝R250:0.5克。考马斯亮蓝R250是主要的染料成分,能够与蛋白质结合并显色。
②异丙醇:125毫升。异丙醇作为有机溶剂,有助于染料的溶解和分散。
③冰醋酸:50毫升。冰醋酸能够调节溶液的pH值,同时也有助于染料的溶解。
④工艺用水(或去离子水):补足至500毫升。工艺用水作为溶剂,用于溶解染料和调节溶液的浓度。
●配制步骤
Step1准备器材:从器具存放室取出所需的玻璃烧杯、量筒和蓝盖瓶等器材,并确保它们干净无污染。
Step2称量染料:使用分析天平准确称取0.5克的考马斯亮蓝R250,并将其置于玻璃烧杯中。
Step3量取溶剂:用量筒分别量取125毫升的异丙醇和50毫升的冰醋酸,然后倒入装有考马斯亮蓝R250的玻璃烧杯中。
Step4溶解与混合:向烧杯中加入约300毫升的工艺用水,然后放置磁力搅拌器转子,并设置转速为500rpm。搅拌至溶质充分溶解,溶液澄清无固体。
Step4定容:在烧杯中用工艺用水补足至500毫升的刻度线,并继续搅拌以确保溶液混合均匀。
Step5过滤与保存:将配制好的溶液倒入500毫升蓝盖瓶中,然后在灭菌室的通风橱内使用漏斗和滤纸进行常压过滤。过滤后的溶液应常温保存,以备后续使用。
●注意事项
▲操作规范:在配制过程中,要确保所有器材干净无污染,并遵循标准操作规程进行操作。避免使用金属器材,以免对溶液造成污染。
▲储存条件:配制好的染色液应存放在避光、干燥、凉爽的地方,避免阳光直射和高温。防止溶液挥发和变质。
▲使用期限:染色液的使用期限取决于储存条件。一般建议现配现用,以保证染色效果。如需长期保存,请遵循相关储存规范。
▲安全防护:在配制和使用过程中,要注意佩戴适当的防护用品,如手套和口罩等。避免染料对皮肤和呼吸道的刺激。
▲通过遵循以上配方和配制步骤,您可以轻松掌握考马斯亮蓝染色液的配制技巧。同时,注意操作规范和安全防护,确保实验结果的准确性和可靠性。
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