GST-puiidown和coip有何区别?
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
提问:GST-puiidown和coip有何区别?
GST pull-down和co-immunoprecipitation(co-IP)都是目前常用的蛋白质交互作用检测方法,它们的区别在于:
1. GST pull-down通常用来检测大量的非特异性蛋白质与目标蛋白相互作用。GST是一种载体蛋白,可以通过将其连接到表达靶蛋白上,在混合
物中捕获与该靶蛋白有相互作用的其他蛋白质。之后,利用GST标记的固定矩阵,用于分离以GST为基础的复合物。而CO-IP则主要用于检测两个
或多个具有特异性结合关系的重要蛋白质的交互。通常使用一种抗体将其中一个蛋白质沉淀下来形成复合物,再使用其它方法分离所形成的复
合物
2. GST pull-down可检测到利用啮齿动物细胞从组织中获得的细胞匀浆等,而CO-IP主要是进行蛋白免疫染色实验,并且其灵敏度也更高。
3. CO-IP通常只能采用单个抗体,用于检测特定的 相互作用 ,而GST pull-down使用基础载体蛋白质的普遍性使其不局限于特定的相互作用关
系
4. GST pull-down技术虽然是一种较为简单,快速、经济的筛查方法,但受到靶蛋白选择性和专一性影响较大,需要根据实验需求进行配合与
补充
综上所述,GST pull-down适用于快速筛查靶蛋白的交互作用,并且通常会引导复杂的分析 。而CO-IP可以更加精确地分析两种特定蛋白之间的
相互作用,对于分析协同作用非常方便。
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