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EMSA实验的步骤【EMSA实验外包】

2023-04-20 14:07:40

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台


    普拉特泽生物为广大生命科学研究人员提供EMSA实验外包服务,可根据实方案的要求选择不同的检测方法,本文就跟大家一起学习用与查看EMSA实验的步骤:



EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay)实验是一种核酸与蛋白质相互作用分析技术,主要涉及以下步骤:


    1. 基础物质准备:制备所需的DNA或RNA片段和待测蛋白质样本。


    2. 标记核酸:核酸片段通常通过放射性标记、非放射性荧光标记等方法进行标记。例如可使用5-end-labeled 或3-end-labeled 的引物来进行标记。


    3. 核酸与蛋白质的混合:将已标记的核酸样品与待测蛋白质混合,并在液氮上迅速冰冻。


    4. 电泳:将混合样品通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,在其中形成蛋白-核酸复合物和不结合蛋白质的两条条带。


    5. 条带显影:通常通过染色和暴露曝光来检测复合物是否形成及其强度和位置。


    6. 结果观察:通过Gel Imaging System或显微镜等设备来观察和记录EMSA实验结果,根据条带位置、密度以及峰值面积等参数来对蛋白质-核酸复合物的特异性和强度进行分析。


    需要注意的是,EMSA实验具有一定的复杂性和技术难度,样品制备、核酸标记、聚丙烯酰胺凝胶电泳条件等方面都需要仔细控制。因此,在进行EMSA实验前应该认真阅读相关文献和实验说明书,选择合适的方法和条件,并依据实验结果加以改进和优化。







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