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EMSA测定需要多少量的蛋白标记的探针?

2023-04-21 11:35:52

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台


    在EMSA实验中我们经常会遇见各种各样的实验问题,现在普拉特泽实验室要为大家解答之前提出的经常会遇见的问题,其中之一那就是在EMSA测定需要多少量的蛋白标记的探针?现在我们就来看看吧~


EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay)实验中所需的蛋白标记探针量可以根据具体实验目的和样品情况而定,需要考虑以下因素:


    1. 核酸探针大小:一般来说,小于100 bp的核酸片段需要更少的蛋白;大于500 bp的核酸片段可能需要较多的蛋白。


    2. 蛋白质性质和浓度:一些蛋白质可能需要更多的核酸探针来形成复合物。 在实验之前应进行探针与蛋白间结合反应的试验,确定试验体系最适合的蛋白质/探针比例。


    3. 核酸探针标记方式:不同的标记方法会对核酸探针稀释度产生影响。有时减小放射性核酸探针的用量可能为简化操作提供了方便。


一般来说,最好在每个实验条件下进行探针用量的测试,并根据结果进行调整。通常建议使用约50-200 fmol的标记探针,同时增加控制实验组以帮助正确解读结果。

                


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