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Dot Blot实验和western blot实验有何区别?

2023-04-24 14:34:40

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

    提问:Dot Blot实验和western blot实验有何区别?

Dot Blot和Western Blot是两种检测目标蛋白质存在的常用方法。它们之间有以下区别

    1. 基本原理:Dot Blot实验在膜上直接滴点分析样品中是否存在特定蛋白质,而Western Blot实验先通过SDS-PAGE将样品中的蛋白质进行分

离,再根据特异性抗体来检测某个具体的蛋白质。

    2. 操作难度:相比较Western Blot, Dot Blot相对容易进行,缩短了实验周期和操作时间。

    3. 灵敏度:Western Blot方法比Dot Blot更为灵敏,并且可以提供分子量等更具精度的信息; 而当需要非常高的灵敏度时,摸索Dot Blot实验是一个更好的选择,因为Westem blot 分析所需的蛋白质数量,通常至少为Dot Blot实验所需的10倍。

    4. 样品来源及基质构成限制:由于Dot Blot不需要对蛋白进行电泳分离,所以几乎可以用任何类型的样品及其提取物,对于卡路里较低的无脂血清及其他时要求不影响蛋白质三维结构配合的实验,这一特点尤其重要。





总之,根据实际需要和操作现实性进行选择。当需要验证特定蛋白质的存在或数量时,Dot Blot是更为常规的方法;而当时间成本较高或者所需样品有限时,则可以选择Dot Blot实验。

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