首页 > 技术文章 > 阐述siRNA和shRNA在细胞实验中的使用差异

阐述siRNA和shRNA在细胞实验中的使用差异

2024-09-20 17:14:31

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

    在细胞实验中,siRNA(小干扰RNA)和shRNA(短发夹RNA)作为两种重要的基因沉默工具,它们在使用上存在着明显的差异。普拉特泽生物工具平台承接shRNA载体构建技术上百例,早就为大家把实验过程中要踩的雷、吃的亏帮大家吃完了,现在我们就来看看——

以下是对这些差异的详细阐述:

1. 结构与构建方式

‌siRNA‌:

结构:siRNA是一种双链RNA分子,长度通常在21-23个核苷酸之间,其3'端常有两个游离的碱基。这种结构使得siRNA能够直接与目标mRNA结合,从而引发RNA干扰(RNAi)效应。

构建方式:siRNA通常是人工化学合成的,通过针对目标基因的特定序列进行设计,确保其与目标mRNA的高效结合。


‌shRNA‌:

结构:shRNA是一种具有茎环结构的单链RNA分子,其长度也在19-25个核苷酸范围内。这种特殊的茎环结构使得shRNA在细胞内能够被Dicer酶识别并切割成siRNA,进而发挥基因沉默作用。

构建方式:shRNA通常是通过基因克隆技术构建在质粒或病毒载体上,这些载体在细胞内能够持续表达shRNA,从而不断产生siRNA。


2. 作用机制

‌siRNA‌:

当siRNA进入细胞后,它会与RNA诱导的沉默复合体(RISC)结合,形成RISC-siRNA复合物。这个复合物能够特异性地识别并降解与siRNA互补的目标mRNA,从而实现基因沉默。

‌shRNA‌:

shRNA进入细胞后,首先被Dicer酶识别并切割成siRNA。随后,这些siRNA通过与RISC结合,同样能够特异性地降解目标mRNA。由于shRNA是通过载体在细胞内持续表达的,因此它能够不断地产生siRNA,从而维持更长时间的基因沉默效果。


3. 稳定性与持久性

‌siRNA‌:

由于siRNA是化学合成的,它在细胞内的稳定性相对较低。一旦进入细胞,siRNA会逐渐被降解,因此其基因沉默效果通常只能维持数天到一周左右。

‌shRNA‌:

由于shRNA是通过载体在细胞内持续表达的,因此它能够不断地产生siRNA,从而维持更长时间的基因沉默效果。在某些情况下,shRNA甚至可以整合到细胞的基因组中,实现遗传性的基因沉默。


4. 应用场景

‌siRNA‌:

适用于需要快速、短期基因沉默效果的实验场景,如急性基因功能研究、药物筛选等。siRNA的即时性和高效性使得它成为这些领域中的理想选择。

‌shRNA‌:

我们的团队由经验丰富的生物学家、技术专家及资深工程师组成,他们不仅拥有深厚的学术背景,更具备将理论转化为实践的卓越能力。在这里,每一个细节都被精心雕琢,每一次操作都力求完美。

适用于需要长期、稳定基因沉默效果的实验场景,如细胞系构建、基因功能长期观察、体内基因治疗等。shRNA的持续性和稳定性使得它成为这些领域中的重要工具。

综上所述,siRNA和shRNA在细胞实验中的使用差异主要体现在结构与构建方式、作用机制、稳定性与持久性以及应用场景等方面。根据实验的具体需求和目的,研究人员可以选择合适的基因沉默工具来开展实验工作。

要资质有资质

要经验有经验

要案例有案例

好,siRNA和shRNA在细胞实验中的使用差异就介绍到这里啦~

有关于shRNA的任何问题或实验咨询

找她↓↓↓