CCK8实验作为一种常用的细胞增殖检测方法，因其简便、快速和准确的特点而备受研究者们的青睐，前两篇普拉特泽生物总结了CCK8检测实验报告（一）、CCK8检测实验报告（二），本文将为大家提供一份CCK8实验的新手教程，帮助科研小白快速入门，轻松掌握细胞增殖检测技巧。

上篇：CCK8检测实验报告（一）

中篇：CCK8检测实验报告（二）

链接奉上，那现在我们来接着总结：

本文将为你提供一份CCK8实验的新手教程，帮助你快速入门，轻松掌握细胞增殖检测技巧。

一、实验原理及准备

CCK8实验，全称为Cell Counting Kit-8实验，是一种基于WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成具有高度水溶性的橙黄色甲臜产物，颜色的深浅与细胞的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450nM波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。

在开始实验前，我们需要准备以下材料：CCK8试剂、细胞培养基、细胞悬液、96孔板、酶标仪等。同时，确保实验环境干净整洁，细胞培养条件适宜。

二、实验步骤

①细胞接种：根据实验需要，将细胞悬液接种到96孔板中，每孔加入适量的细胞悬液，确保细胞分布均匀。

②细胞培养：将接种好的96孔板放入细胞培养箱中，根据细胞类型和实验需求设置适当的培养条件，如温度、湿度、CO2浓度等。

③CCK8试剂加入：在设定的时间点，取出96孔板，向每孔中加入适量的CCK8试剂。注意避免产生气泡，以免影响实验结果。

④孵育：将加入CCK8试剂的96孔板放回细胞培养箱中，继续孵育一定时间。孵育时间的长短应根据细胞类型和实验需求进行调整。

⑤测定光吸收值：孵育结束后，取出96孔板，使用酶标仪在450nM波长处测定每孔的光吸收值。记录数据并进行分析。

三、实验注意事项

→细胞接种密度要适中，避免细胞过密或过疏影响实验结果。

→CCK8试剂加入量要准确，避免对实验结果造成干扰。

→孵育时间要根据细胞类型和实验需求进行调整，以获得最佳的实验结果。

→实验过程中要注意无菌操作，避免细胞污染。

四、实验结果解读

根据测定的光吸收值，我们可以绘制细胞增殖曲线或计算细胞毒性率。通过对比不同实验组的数据，可以分析药物对细胞增殖的影响、不同细胞株的生长差异等。

五、总结

CCK8实验作为一种简便、快速的细胞增殖和毒性检测方法，在生物医学研究领域具有广泛的应用前景。通过本文的介绍，相信新手们已经对CCK8实验有了初步的了解。只要掌握正确的实验步骤和注意事项，大家都能轻松上手，为科研工作提供有力的支持。

冰冻三尺，非一日之寒，普拉特泽致力于帮助广大科研工作者解决CCK8实验中的各方面问题，不但授人以鱼，亦授人以渔。