Masson检测实验
来源/作者:普拉特泽生物-医学整体课题外包
Masson实验的原理
Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色(被亮绿所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗 透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染,肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
一、实验目的
对大鼠皮肤样本进行Masson染色,用于显示组织中的纤维。
二、实验样本及分组
样本:大鼠皮肤组织
分组:control组1 day3、control组3 day3、control组4 day3、、control组5 day7、control组6 day5、control组7 day7、control组8 day14、 control组9 day14
实验组1 day14、实验组2 day14、实验组3 day7、实验组4 day14、实验组5 day7、实验组6 day3、实验组7 day3、实验组8 day3、实验组9 day7
三、实验结果
control组1 day3 实验组1 day14
图1 Masson染色示意图 100×
问题:样本结痂部位形态不完整,易出现碎裂褶皱及深染。
结痂部位Masson染色图 40X
正常皮肤部位Masson染色图 40X
四、实验结论
胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色),胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色,胞核黑蓝色。
五、实验材料
5.1主要耗材
仪器名称 | 品牌 | 型号 |
生物组织摊烤片机 | 武汉俊杰电子有限公司 | JK-6 |
显微镜 | 莱卡 | DM2000 LED |
盖玻片 | 世泰 | / |
载玻片 | 世泰 | / |
5.2主要试剂
产品名称 | 品牌 | 货号/规格 |
Masson三色染色液 | Frdbio | BHC0620 |
中性树胶 | 中国上海标本模型厂 | 100 g |
无水乙醇 | 湖南汇虹 | 塑AR2500 ml |
二甲苯 | 湖南汇虹 | AR500 ml |
六、实验步骤
(1) 石蜡切片脱蜡至水。
(2) 铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
(3) 依次自来水和蒸馏水洗。
(4) 用苏木精染液染核5-10 min。
(5) 充分水洗,如过染可盐酸酒精分化,蒸馏水洗。
(6) 用Masson复合染色液染色10-20 min,蒸馏水洗。
(7) 1% 磷钼酸水溶液分化3-5 min。
(8) 不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5 min。
(9) 以1%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
(10) 95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固,显微镜观察。
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