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ELISA检测实验报告(二)

2024-08-30 11:28:49

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

    Question:ELISA实验的方法有哪些?(普拉特泽生物提供长期稳定的ELISA实验外包服务)

    答:

一、 实验目的

通过Elisa实验技术检测各样本中目的蛋白的表达。

二、 实验样本

三、 实验结果

1.标准品检测值

2.标准品标准曲线

1  cTn-1 标准曲线

   标准曲线结果显示,本次 cTn-1 检测结果可信。


3. 样品检测结果

图2  Elisa检测柱状图

四、 结果说明

    如图所示,与Sham组相比,3CVB3病毒处理组无显著性差异。

五、 ELISA实验原理

往预先包被的微孔中依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的cTn-1呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度 (OD ),计算样品浓度。

六、 实验通用仪器及试剂

1. 主要仪器

2.主要试剂


六、重温一下ELISA实验步骤

1.样品处理

血清:3000xg离心10分钟,取上清即可检测。

2.ELISA检测步骤(以试剂盒操作说明书为准)

(1)制备好所有试剂、工作标准品和样品。

(2)从板架上移除多余的微孔板条,将它们放入装有干燥剂包的铝箔袋中,重新密封并4ºC存储。

(3)向适当的孔中加入50µL样品和标准品。

(4)每孔加入50µL抗体混合物。

(4)盖好孔,在室温下温育1小时,400rpm摇动。

(5)弃去溶液并用洗涤缓冲液洗涤3次。

(6)向每个孔中加入100μlTMB,400rpm避光室温孵育100min

(7)每孔中添加100µL终止液,混匀1min,450 nm处读取吸光值。

好啦,那关于ELISA实验我们就介绍到这里啦,还有关于ELISA实验更多问题咨询的欢迎留言哦,技术小姐姐会第一时间给到最专业的回复哒!还有需要ELISA实验代做服务请认准咱们普拉特泽哦!