PAS检测实验报告【小鼠肾】
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
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一、实验目的
对组织样本进行PAS染色。
二、实验样品及分组
样本:小鼠肾
三、实验结果
图1 PAS染色示意图100×
四、实验结论
PAS反应阳性物质 红色或紫红色
细胞核 蓝色
细胞质 深浅不一的红色
五、实验材料
1. 主要仪器
2.主要试剂
六、实验原理
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,氧化剂能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。PAS技术常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
七、方法步骤
(1) 常规固定、脱水、包埋。
(2) 石蜡切片脱蜡入蒸馏水;然后将冰冻切片直接入蒸馏水。
(3) 自来水冲洗2-3 min,再用蒸馏水浸洗2次。
(4) 置于氧化剂中,室温(25-30℃)放置5-8 min,一般不宜超过10 min。
(5) 自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。
(6) 样本放入Schiff Reagent,置于室温(25-30℃)阴暗处,浸染10-20 min。
(7) 自来水冲洗10 min。
(8) 样本置于苏木素染色液中,染细胞核1-2 min。
(9) 酸性分化液分化2-5 s。
(10) 自来水冲洗10-15 min后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
(11) 逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。
显微镜下观察拍照
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