细胞周期，是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期两个阶段。细胞间期又分为C0期、G1期、S期、G2期；细胞分裂期即M期。

G0/G1期：G1期，细胞体积逐渐增大，细胞开始RNA和蛋白质的合成，DNA含量保持二倍体状态，G0期是脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段。但在一定适宜刺激下，又可进入周期，从DNA含量上无法区分G0与G1期；

S期：在这一阶段完成DNA的合成以及合成与DNA组装构成染色质等有关的组蛋白。DNA含量在此时期增加，介于G1期和G2期之间；

G2/M期：G2期是DNA复制结束和开始有丝分裂之间的间隙。从DNA含量上同样无法区分G2期和M期。

检测细胞周期最常用的方法就是检测细胞DNA含量，正常生长的细胞都会经历分裂过程，G0/G1期是两倍体时期，S期DNA开始合成，到G2/M期，细胞处于四倍体时期，之后细胞一分为二，进入下一个细胞周期。

碘化丙啶(Propidium ，简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。

1、离心收集细胞，弃上清，用预冷的PBS洗涤2次；

2、细胞固定：用残留的少许PBS混匀沉淀，缓慢加入-20℃预冷的70%乙醇，边加边摇匀，避免细胞粘连在一起，置于-20℃冰箱固定4h以上；

3、细胞染色：350g离心5 min，弃上清，用2mL的PBS洗涤2次，按照10^6 cells 加入500μLPBS，含50μg/mL的PI，100μg/mL的RNaseA，4°C避光孵育15 min-30 min（可将PI直接用PBS配成工作浓度，RNaseA现加进去）；

4、上机分析：由于PI具有很强的粘附性，容易使细胞聚团，建议过滤后再上机分析，同时别忘了检查流式仪器的状态，一般低速收集2-3万个细胞即可。

1、纵坐标Cell Number：即计数的有效细胞数；

2、横坐标DNA Content：即DNA含量；

3、常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞DNA含量（横坐标）来分析的；

4、G0/G1期：DNA复制还没开始，也是DNA含量最少的，即流式检测结果图的第一个峰；

5、S期：DNA开始复制，到完成复制，是一个一倍DNA到二倍DNA的过程，在流式结果图中显示期跨度特别大（第二个不高但很宽的峰）；

6、G2期：DNA复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍DNA，在流式结果图中的第三个峰；

7、M期：细胞分裂过程，此时细胞内也是二倍DNA，用DNA含量的方法是无法与G2期分开。

8、右侧数字含义：Dip G1-58.65% at 50.38%，即G1期DNA含量平均值为58.65%；G1期细胞数占总数的50.38%，以此类推。

1、PI既能与DNA结合，又能与RNA结合，所以要用RNase消化RNA；

2、进样速度：进样速度为低速。若峰形较宽，可能就是进样速度太快；

3、仪器质控定期做，尽可能排除因机器设置引起的峰形加宽；

4、排除粘连细胞（FL2-A/FL2-W），最大程度的减少粘连细胞带来的假阳性结果。

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