外泌体提取步骤由普拉特泽生物为大家总结分享，普拉特泽生物长期承接各种样本外泌体提取纯化与鉴定服务，积累大量的实操经验，本文就来给大家分享一下外泌体提取的步骤：
   一、什么是外泌体？

  外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为 30-200 nm，密度在 1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放 exosome。目前外泌提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。

        二、实验流程

        血清/血浆样本：

        1. 分离得到血浆/血清。

        2. 低速离心去除碎片及杂质。

        3. 超速离心获得外泌体沉淀。

        4. 外泌体纯化。

        5. BCA法检测外泌体浓度。

        培养上清样本：

        1. 培养液收集。

        2. 低速离心去除细胞、碎片及杂质。

        3. 超速离心获得外泌体沉淀。

        4. 外泌体纯化。

        5. BCA法检测外泌体浓度。

  即在 4℃下，首先 300×g 离心10min，吸取上清液，然后2000×g离心10 min；吸取上清液后，10 000×g高速离心30min，吸取上清液；140000×g超速离心90 min；除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体。用PBS缓冲液洗涤沉淀并重悬后，140000×g再次离心90 min，100μLPBS缓冲液重悬沉淀，冻存于-80℃备用。

  外泌体提取过程说难不难，但因为样本量量少或样本特殊的原因很多情况下很难提取出来，所以如果您有外泌体提取的需求欢迎随时咨询普拉特泽生物~