关节炎动物模型造模步骤【关节炎模型外包】
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
关节炎模型造模实验步骤由普拉特泽生物分享,上期我们分享了《关节炎造模的造模方法》,骨关节炎以进行性的关节软骨退变、滑膜炎症、软骨下骨改变和骨赘形成为特征,关节炎动物模型可以直观研究关节炎病的致病机制发病原因等,是临床研究关节炎的重要方法。普拉特泽生物动物实验平台长期承接关节炎动物模型外包实验,提供各种类型的关节炎动物模型外包服务,本文就来跟大家一起学习三种常用的关节炎动物模型造模方法:
一、前交叉韧带横断模型关节炎模型
交叉韧带是防止胫骨移位、维持膝关节稳定性的重要结构之一,与膝关节屈曲伸直位、肌肉收缩状态、负重或非负重区都有关系。单纯前交叉韧带离断术可以改变关节前向稳定,增大关节间活动度,增加骨摩擦,加快关节退行性变进程。
造模过程(以大鼠为例):
1、大鼠按剂量腹腔注射10%的水合氯醛进行麻醉。
2、麻醉后大鼠右后肢备皮消毒,在膝关节炎内侧做一个纵向约3cm的切口,沿髌骨韧带向上轻开一个小口,剪开肌肉,屈膝,将髌骨外翻。暴露交叉韧带后,剪断前交叉韧带。
3、然后进行抽屉实验,确认前交叉韧带是否完全断离,逐层缝合伤口。
二、关节腔内注射药物关节炎模型
关节对照组与模型组大鼠在实验过程中未发生死亡或其它异常情况,注射MSU造模2个月后,取大鼠膝关节骨组织固定,具体模型构建情况还需以病理检测结果为准。
1、购进的SD大鼠适应性饲养3天,期间正常饮水和喂食;
2、实验前一天对大鼠进行禁食16h,10%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.4ml/100g);
3、剪去大鼠膝关节处毛发,暴露膝关节处皮肤,将配制好的MSU溶液稀释至合适浓度,使用一次性注射器将5mg/50uL MSU注射到模型组大鼠的膝关节腔中,对照组注射同等体积的生理盐水;
4、注射完成后停顿3秒左右,缓慢将注射器拔出,按压注射点数秒,将各组大鼠放回笼内,正常饲养;
5、组织取材,每3天观察各组大鼠状态是否出现异常,若无异常,2个月后处死各组大鼠,取膝关节固定保存。
三、关节制动法关节炎模型
目前常采用的肢体制动体位有伸直位、屈曲位、中间位等对模型动物进行关节的机械性制动,最为经典的是Videman造模法。
造模步骤(以兔子为例):
1、动物适应性喂养动物房12h-12h昼夜交替,保证兔子自由饮水、进食,温度23-25℃,适应性喂养一周后进入实验。
2、兔子耳缘备皮,耳缘静脉注射7%水合氯醛麻醉。
3、兔子后肢备皮去毛,牵拉右腿使右膝关节处于伸直位,将兔右后肢于腹股沟以下1.5cm至裸关节下3cm(趾端)先包裹医用无菌纱布,3层左右,石膏布浸水2-3min,小心拧干水分。
4、将处理好后的石膏布于腹股沟以下1.5cm至裸关节下3cm(趾端)沿纱布继续包裹(不可过松、过紧),约4-5层,最后用医用胶带缠裹固定。
5、等石膏干硬(冬季可用吹风机加热)后,将绑好后的兔子放回兔笼。
6、制动2周软骨病理呈早期OA改变,固定时间越长,病理程度越重。制动6周,造模关节X线出现关节间隙狭窄、唇样增生等典型中晚期OA特征。
7、取材拍照观察实验样本。
好啦,那关于骨关节炎模型的造模步骤就讲完啦,希望可以帮到您~如果您觉得自己造模太繁杂有关节炎模型代做的需求,欢迎选择普拉特泽生物~