肝纤维化动物造模步骤上篇【肝纤维化造模外包】
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
肝纤维化动物造模操作步骤由普拉特泽生物动物技术人员为大家总结分享。肝纤维化是肝脏受到损伤后细胞外基质合成、降解与沉积不平衡的一种修复反应,肝纤维化动物模型的建立可以更好地帮助研究者了解分析肝纤维化的发病机制与研发临床治疗方法。普拉特泽生物动物实验平台长期提供肝纤维化动物模型外包服务,专业认真。
上期我们分享了肝纤维化动物造模常用的四种方法,CCl4诱导大鼠肝纤维化模型、二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型、胆汁淤积诱导肝纤维化模型、营养型等其他肝纤维化模型,本文来详细分享用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的实验步骤。
一、CCl4诱导大鼠肝纤维化模型实验步骤
CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的造模机制:CCl4为一种选择性肝毒性药物,其进入机体后在肝内活化成自由基如三氯甲基自由基(CCl3),后者可直接损伤质膜,启动脂质过氧化作用,破坏肝细胞的膜性结构等,造成肝细胞变性坏死和肝纤维化的形成。造模方法:大鼠:CCl4与橄榄油1:1比例混合均匀。小鼠:CCl4与橄榄油1:7比例混合均匀大鼠皮下、腹腔或口服给予配制好的造模剂,剂量为1-2ml/kg,每周2次,保证给药时间间隔一致,持续6-8周即可出现肝脏的纤维化症状。
1、实验动物、材料的准备
实验动物:
8周龄,体重为230±20g左右的SD大鼠
8周龄,体重为25±2g左右的C57Bl/6小鼠
实验材料:CCl4、橄榄油(植物油)、注射器
2、实验操作
(1)试剂配制:大鼠:CCl4与橄榄油1:1比例混合均匀;小鼠:CCl4与橄榄油1:7比例混合均匀
(2) CCl4诱导大鼠皮下、腹腔或口服给予配制好的造模剂,剂量为1-2ml/kg,每周2次,保证给药时间间隔一致,持续6-8周即可出现肝脏的纤维化症状。
(3)观察实验动物的病理变化位置:中心叶或门静脉区。
(4)CCl4易挥发,最好配置当天使用。在进行正式试验之前最好进行一次预实验,验证所选的动物及造模时间是否符合预期。
二、二甲基亚硝胺诱(DMN)导肝纤维化模型实验步骤
二甲基亚硝胺诱导肝纤维化模型造模机制:NDMA是一种致癌物,大剂量使用,NDMA进入肝细胞经微粒体代谢生成乙醛,后者引起肝细胞损害,肝坏死和肝纤维化。
1、实验动物、材料准备
实验动物:8周龄,SD大鼠,体重230±20g左右
实验材料:DMN,生理盐水
2、实验操作
(1)试剂配制:称量一定量的DNN,使用生理盐水按照10mg/kg的剂量进行配制。
(2)3次/周腹腔注射,连续给药大于4周,检测相关肝脏损伤和纤维化指标以便判断纤维化是否发生。
(3)观察实验动物病理变化位置:汇管区纤维化(中央门静脉区)
(4)实际的操作中我们要注意:给药方式理论上是每周给药三次,但要根据实际动物状态,调整给药的频率,适当的减少或者增加,若减少频率需增加给药时间,增加给药频率可适当减少给药时间,但一般都要持续4周。
好啦,那关于肝纤维化动物模型的CCl4和二甲基亚硝胺诱导肝纤维化动物模型实验步骤就讲完啦,如果您对实验步骤有任何建议或疑问可以随时留言给客服,技术会及时给到解答的,如果您有肝纤维化动物造模实验外包的需求,欢迎选择普拉特泽生物~