非酒精性脂肪肝造模详细步骤【非酒精性脂肪肝造模外包】
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
非酒精性脂肪肝造模实验步骤由普拉特泽生物为大家总结分享,非酒精性脂肪肝在现在人群中发病年率越来越高,动物模型研究非酒精性脂肪肝的发病原理与机制是药物研究的重要手段。普拉特泽生物动物实验平台专业提供各类脂肪肝造模外包服务,本文就来跟大家一起学习,非酒精性脂肪肝造模的详细操作步骤~
根据脂肪肝的不同病因,有多重造模方式,如高脂饲料喂养、酒精损害、毒物损伤、复合因素等方法,本文分享的是高脂饲料喂养进行非酒精性脂肪肝造模的方法。
1、实验准备
实验材料准备: SD 大鼠40只,体重200~~220g,清洁级;猪油、鸡蛋黄自备;高脂造模饲料;普通饲料
2、实验方法
(1)动物分组及处理 SD 大鼠40只,随机分为两组各20只。除正常对照组外,全部给予高脂饮食复制非酒精性脂肪性肝炎模型。
(2)高脂饮食由普通饲料加15%猪汕,8%蛋黄粉,2%胆固醇组成,观察动物的体重、饮食、毛发、活动情况、肝/体重比等。。
(3)在造模第4周、8周、18 周分别处死模型组动物各2只,观察其病理模型形成情况。
(4)第18周末将大鼠用2%戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔注射,麻醉后下腔静脉取血,将血标本离心后用于血脂检测;取肝左叶,用10%中性福尔马林溶液固定。
(5)石惜包埋切片,作肝细织病理学观察。
3、实验结果
(1)动物的一般情况
实验期间正常组动物精力充沛,灵活好动,饮食正常,皮毛整洁,体重缓慢增加;
模型组饮食量大,嗜睡,毛色偏黄,个体较大,体重增长较正常组较快,至8周时,模型组各动物体重较正常组平均重21%,有不同程度的精神萎靡,活动减少,皮毛凌乱。
(2)体重和肝指数
两组大鼠体重和肝指数,模型组较正常组体重及肝指数均显著增加
(3)血脂
检测两组大鼠的血脂,模型组与正常组相比,有显著的差异性。
(4)肝脏病理学变化
肉眼观察:肉眼观察 正常组大鼠肝脏形态正常,18周时无一例出现异常。模型组大鼠造模4周起肝脏外形稍饱满圆钟,质地较脆,色红;8~12 周肝脏体积增大,包膜紧张,色泽灰黄,切面油腻;18 周时,模型组动物肝脏明显增大,包膜紧张,边缘较钝,质地略软,色变黄,表面呈花斑状,触之似泥块并有油腻感,部分大鼠肝脏有黄白鱼的局灶性脂肪沉积。
光镜观察:
正常组肝小结构正常,肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列。无肝细胞肿胀及脂肪变性。模型组肝组织HE染色显示:造模4周后大鼠肝脏即有轻微的肝细胞脂肪变性,标本还出现汇管区及小叶内炎症细胞浸润和散在的点状坏死;造模8周大鼠多呈中度脂肪变,且炎症活动积分明显高于造模4~8 周大鼠,可见到小叶内炎症,炎症细胞主要以单核细胞为主,炎症程度明显加重;造模 18周大鼠呈中重度的大泡性脂肪变,脂滴分布密度通大,可见大部分旺细胞浆含大脂滴,部分脂滴形成大空泡。将细胞核挤压至一边,目以中央静脉周围为其:肝小叶结构破坏,肝细胞排列不规救,并伴大量肝细胞肿胀,部分呈气球样变,汇管区炎症尚轻微。
好啦,那关于非酒精性脂肪肝动物造模的注意事项咱们就讲到这里啦,有不懂的操作欢迎随时留言给我们,如果您也正在准备进行非酒精性脂肪肝动物造模实验或有动物造模外包的需求,欢迎选择为真实实验而生的普拉特泽生物~
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