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植物组织的培养方法【细胞实验外包】

2022-08-17 15:47:45

来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台

        植物组织培养方法由普拉特泽生物——细胞实验平台总结分享。细胞的培养是所有细胞实验操作的基础,分化、培养出健康的细胞生物学、植物学、分子生物学三个研究领域都举足轻重的重要,普拉特泽生物细胞实验平台专业承接几十种细胞实验,技术们在各种细胞实验的操作中身经百战,细胞培养方面技能点早已点满,今天咱们就来分析分析——植物组织培养的介绍与详细步骤!

        上期我们讲完了动物细胞原代与传代培养的详细步骤,可以跟植物细胞的培养步骤对比记忆,记得更深哦,链接奉上,温故而知新哦:

       动物细胞原代培养……………………………………实操步骤》

        动物细胞传代培养……………………………………实操步骤》

          老生常谈了,要学习一个东西我们要从是什么、为什么、怎么做、三个方面来了解。
   一、什么是植物组织培养呢?

          植物组织培养是在离体条件下,将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养,得到分散成游离的悬浮细胞,通过继代培养使细胞增殖,从而获得大量细胞群体的一种技术。

           一、为什么要分离培养植物组织或细胞?

            1、植物细胞的培养在研究细胞的增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡等方面都是重要的研究手段,且是细胞信号转导、起源、基因表达与调控方面的基础研究条件。

            2、可以从植物细胞培养中获得香料、药品、食品添加剂。

            3、扩大了植物繁殖途径,便于无性微繁体系的保存,对珍惜濒危物种保护有重大意义,有利于种子繁殖率低的植物的保护,便于工厂化生产等

           三、植物组织培养应该怎么做?

           1、外植体的选择和预处理

         1外植体外植体是指从植物体上取出的用于无菌培养或直接分离细胞的部分植物组织或器官,我们可以从植物体的各个部位都可以成功地获得植物细胞,但是不同植物、不同器官的脱分化和再分化能力不同,分离细胞和原生质体的难易和效果也有很大差异。

         2无菌和消毒:通常应当选择生长正常、无病虫害的植株,并从中选择适宜的组织器官作为外植体,主要包括:

        茎尖、茎段及叶片的消毒处理

        果实及种子的消毒处理

        根及地下贮藏器官等的消毒处理

        花药的消毒处理

        外植体的其他处理

            2、愈伤组织的形成和形态发生

            植物细胞的全能性在发育和分化的过程中并不会丧失,但在完整的植株中每个细胞都是组织的一员。几乎所有高等植物细胞,一旦脱离了母体植株,摆脱了原来所受到的遗传上的控制和生理上的制约,在不定期下的培养条件下,就会发生一种回复变化,从而失去分化状态,变为分生细胞,实现脱分化过程。

            然后,这些脱分化细胞经过连续的有丝分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的形成主要分为诱导期、分裂期、形成期三个时期。

             3、愈伤组织的继代培养

            脱分化细胞不断进行分裂,从而形成了愈伤组织,愈伤组织在培养基上生长一段时间以后,由于营养物质枯竭,水分散失,以及代谢产物的积累,必须转移到新鲜培养基上培养。这个过程叫做继代。

            通过继代培养,可使愈伤组织无限期地保持在不分的增殖状态。然而,如果让愈伤组织留原培养基上继续培养而不继代,它们则不可避免地发生分化,产生新的结构。

             4、愈伤组织的生长

             脆的愈伤组织是进行悬浮培养最适合的材料,稍经机械振荡即可使组织分散成单细胞或少数几个细胞组成的小细胞团。在培养中细胞产生迅速增殖,而坚实的愈伤组织中的细胞间被果胶质紧紧地粘着,因而往往不能形成良好的悬浮系统。

             一般愈伤组织的增殖生长只发生在不与琼脂接触的表面,而与琼脂接触的一面极少细胞增殖,只是细胞分化形成紧密的组织块。它是愈伤组织表面或近表面瘤状物生长的结果。

             愈伤组织之间的质地有显著不同,有的很松脆,有的很坚实,且这两类愈伤组织可互相转变。其方法是:加入高浓度的生长物质,可使坚实的愈伤组织变为松脆。反之,减低或除去生长物质,则松脆的愈伤组织可以转变为坚实。

              5、愈伤组织形态的调控

             来源于不同植物或同一种植物不同部们的愈伤组织,在颜色、结构和生长习性上都可能存在差异,其遗传生理功能也可能或是具有胚性,或是不具胚性,在不同的实验中由于目的的不同,对愈伤组织状态的要求也不完全相同,但优良的愈伤组织通常必须具备以下4个特性中的2-3

            1高度的胚性或再分化能力,以便从这些愈伤组织得到再生植物。

            2容易散碎,以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系,并且在需要时能从中分离出全能性的原生质体。

             3旺盛的自我增殖能力,以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系。

             4经过长期继代保存而不丧失胚性,有便有可能对它们进行各种遗传操作。细胞和愈伤组织的形态发生,主要受外植体本身、培养基和培养环境等三大类因素的调控。

              好啦,那关于植物组织培养的详细方法就介绍到这里啦,共细胞培养的小白们简单参考,如果您有细胞培养或细胞实验代做的需求与技术需要咨询,欢迎留言和细胞实验平台的技术沟通哦!