小鼠肠炎模型构建方法详解
来源/作者:普拉特泽-生物医学整体课题外包平台
小鼠肠炎模型是研究肠炎发病机制、评估药物疗效的重要工具,普拉特泽生物承接小鼠肠炎模型等动物实验相关服务上万例,积累了操作大量经验,可承接动物实验外包服务。
下面我们进入正题——几种常见的小鼠肠炎模型构建方法的详解:
一、DSS诱导法
DSS溶液配制:
●称取一定量的DSS,使用水溶解,配置成2%~5%(w)的DSS水溶液。DSS溶液配制好完成后可在4℃避光保存。
造模过程:
●将小鼠按照体重随机分组。
●将小鼠水瓶内的水溶液更换为DSS水溶液,按照5ml/只/天的量进行准备,隔两天后更换新的DSS溶液(DSS给药时为day1,在day3、day5更换DSS溶液)。
急性模型:第8天将DSS溶液更换为不含DSS的清水。
慢性模型:第8天将DSS溶液更换为不含DSS的清水,清水摄取持续14天后,重复前面的步骤2~3次。
观察与评估:
●造模后持续观察小鼠状态,可以通过DAI评分判定小鼠成模情况。
●可以通过观察结肠长度以及病理组织情况来评估造模效果。
二、TNBS诱导法
试剂配制:
●将TNBS溶于水,配制成5%TNBS(w)水溶液。
●配制橄榄油与丙酮比例为1:4(v)的均匀混合溶液,使用该混合液将5%的TNBS稀释为1%的TNBS溶液;或者使用无水乙醇将5%的TNBS稀释为1%的TNBS溶液。
三、造模过程:
●小鼠背部去毛(1.5×1.5 cm),取配制好的1%的TNBS溶液150μL均匀涂抹在去毛位置。
●七天后,小鼠麻醉后使用1ml注射器通过软管将100μL的1%TNBS缓慢注射进入小鼠直肠内(软管插入直肠的长度大约4 cm),小鼠倒立保持约1分钟。
观察与评估:
●造模后持续观察小鼠状态,通过DAI评分判定小鼠成模情况。
四、恶唑酮诱导法
试剂配制:
●配制橄榄油与丙酮比例为1:4(v)的均匀混合溶液。
●使用橄榄油/丙酮混合液溶剂,称取一定量的恶唑酮,配置成3%的恶唑酮给药溶液;或者使用50%的无水乙醇配制得到1%的恶唑酮给药溶液。
造模过程:
●小鼠背部去毛(1.5×1.5 cm),取配制好的恶唑酮溶液150μL均匀涂抹在去毛位置。
●七天后,小鼠麻醉后使用1ml注射器通过软管将100μL的恶唑酮给药溶液缓慢注射进入小鼠直肠内(软管插入直肠的长度大约4 cm),小鼠倒立保持约1分钟。
五、观察与评估:
造模后持续观察小鼠状态,通过DAI评分判定小鼠成模情况。
四、注意事项
→在进行小鼠肠炎模型构建时,需要严格控制实验条件,确保小鼠的饲养环境、饮食等条件一致。
→在造模过程中,需要注意操作细节,如注射器的选择、注射速度、注射量等,以避免对小鼠造成不必要的损伤。
→在观察与评估阶段,需要采用多种指标综合评估模型的成功与否以及炎症的严重程度。
综上所述,小鼠肠炎模型的构建方法多种多样,每种方法都有其特定的诱导机制和适用范围。在选择构建方法时,需要根据研究目的和实验条件进行综合考虑。
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