TTC染色步骤和数据分析由普拉特泽生物组织染色实验平台为大家总结分享。普拉特泽生物为广大科研人员提供长期稳定的TTC染色外包实验服务，本文给大家分享咱们技术长期总结下来的TTC染色步骤+数据分析：

1.大鼠麻醉后，快速取出脑组织(10min内);

2.置于0-4℃℃PBS溶液中转移，将脑组织-20℃冷冻20min;

3.将冷冻后的脑组织切成厚度为2 mm的薄片;

4.将脑组织切片置于1%TTC溶液中，37℃℃避光孵育30min，每5min轻微晃动容器，使充分染色。

5.取出染好的切片，观察染色情况，白色即为梗死区域。

6.选择每一切片的尾侧面用病理图文分析系统进行图像分析,测量每片的梗死面积和总面积。(每层梗死体积为该层梗死面积和层厚的乘积,各层的梗死体积之和即为总的梗死体积。

二、TTC计算分析:

1.原始图片数据(PS初步合图处理)2.分析处理步骤:纯黑或纯白背景转换

(1)process(2)segmentation

（3）color cube basedwhite or black(5)吸管工具(不停点击切片位置，选取图片)(6)create previewimage

三、TTC计算分析:

1.计算分析步骤:
(1)measure
(2)count/size

(3)Select colors
(4)调整颜色通道:HSI通道 H:0-255;S:0-255;1:14-255

四、TTC计算分析:

3.计算分析步骤:(5)Measure-Select Measure

(6)设置面积选择大小(1)area(2)1000-1000000(可根据实际情况而定)

五、TTC计算分析:

3.计算分析步骤:

(7)Count:开始计算

(9)查看计算结果和数据统计:

(8)计算后界面显示:

六、TTC计算分析:
4.数据查看与导出:

导出步骤一:data to file导出步骤二:选择导出格式

5.梗死面积选定设置:

HIS模式H:0-255;S:0-45;1:150-255(可根据实际情况调整)

6.设置完成，开始统计计算:count;后面步骤和前面总面积计算一样进行，查看数据统计与数据文件导出，最后统计数据

7.总结总体面积与梗死面积，统计分析数据，得出结论，

如果你总是在做实验时总会遇上这样那样的问题需要帮助时，请记得在TTC染色实验中遇到技术问题可添加技术微信：18570028002我司还提供组织染色外包服务或实验培训